苯暴露小鼠血清多肽特征的研究.docx

苯暴露小鼠血清多肽特征的研究张娟，谈柯宏，韦海燕，孙蓉丽，尹立红，浦跃朴(环境医学工程教育部重点实验室，东南大学公共卫生学院，江苏省南京市，210009)目的：通过对苯暴露小鼠血清多肽谱图的研究，发现苯暴露小鼠的特征性血清多肽。方法：选择36只雄性C57B1./6小鼠，随机分成三组，以食用油为溶剂，采用皮下注射染毒,各组苯染毒剂量分别为0、150mg(kg*d)、300mg(kg*d),每周5天，连续4周。染毒结束，进行血常规检测。使用弱阳性离子磁珠(WCX)捕获小鼠血清多肽，运用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Ma1.di-TOF-MS)定量分析获得肽质量指纹谱，筛选组间差异性肽段。使用液相色谱一质谱串联技术(1.C/MS/MS)分析获得显著性差异肽段碎片离子图谱，使用BioworksBrowser3.3.1SP1.分析软件对InternatiOna1.ProteinIndex数据库进行SeqUeStTM检索，分析鉴定该肽段对应多肽。结果：对照组与低、高剂量组小鼠外周血红细胞计数(1()91.)分别为6.61±2.11,3.20±0.78,3.07±0.92,白细胞计数(1071.)分别为8.13±0.32,7.44±0.38,6.93±0.34,实验组相比对照组显著减少(PeO.05)。质谱分析结果提示在质荷比(mz)值为100010000范围内，发现41个离子峰，其中7个峰值在对照组与实验组中表达存在显著性差异(P<0.05),对表达上调超过2倍的两种多肽(1231.2,1241.8)进行串联质谱分析及数据库检索分析，鉴定其分别是6磷酸脱氢酶(G6PD)、热休克蛋白90B1.(HSP90aBD0结论：小鼠苯暴露染毒，实验组红细胞、白细胞相比对照组显著减少，造血功能受到抑制；苯暴露小鼠和正常对照组小鼠外周血清中存在差异性多肽，分别为G6PD和HSP90QB1.o此两种蛋白可能是苯暴露人群的血清生物标志物。这两种蛋白与苯毒性及苯造血毒性的关系有待进一步的研究。