血清铁浓度检测试剂盒说明书.docx

血清铁浓度检测试剂盒说明书微量法100T/96S注意：正式测定之前选择23个预期差异大的样本做预测定。澜定意义：血清铁是指血液中转铁蛋白所结合的铁，该指标常用于鉴别缺铁性与非缺铁性贫血。渊定原理：亚硫酸钠还原血清Fe3+生成成Fe?+,Fe?+进一步与2,2l联毗咤显色，在520nm处有吸收峰，测定该波长光吸收值即可计算血清铁含量。自备仪器和用品：离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、冰醋酸、氯仿和蒸储水。试剂组成和配置:试剂一：粉剂Xl瓶，4匕保存。临用前配制，加入15mL蒸储水充分溶解。试剂二：粉剂Xl瓶，4七保存。临用前配制，加入469L冰醋酸，加入15mL蒸储水充分溶解。标准液：液体ImLXl支（EP管），100molLFe3+标准液，4保存。渊定：1 .分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长到520nm,蒸储水调零。2 .标准液解冻：提前取出标准液，置于室温卜充分解冻后混匀。3 .空白管：取EP管，依次加入125L蒸储水，125L试剂一，125L试剂二，混匀后盖紧，置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62L氯仿（自备），充分震荡混匀；室温I（X）OOrPm,离心IOmin,小心吸取上层液210L,加入微量石英比色皿/96孔板，于520nm测定吸光度，记为A空白管。4 .标准管：取EP管，依次加入125L标准液，125L试剂一，125L试剂二，混匀后盖紧，置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62L氯仿，充分震荡混匀；室温100OOrpm,离心IOmin,小心吸取上层液210L,加入微量石英比色皿/96孔板，于52Onm测定吸光度，记为A标准管。5 .测定管：取EP管，依次加入125L血清，125L试剂一，125L试剂二，混匀后盖紧，置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62L氯仿，充分震荡混匀；室温100OOrpm,离心IOmin,小心吸取上层液210L,加入微量石英比色皿/96孔板，于520nm测定吸光度，记为A测定管。注意：空白管和标准管只需测定一次。血清铁浓度计算公式：血清铁含量（moldL）=C标准液X（A测定管一A空白管）÷（A标准管一A空白管）xV总、=10×（A测定管一A空白管）÷（A标准管一A空白管）C标准液：100molLFe3+标准液；V总：标准液总体积ImL；IdL=O.1L。注意事项：1、血清铁含量少，所用器皿（EP管）需要注意，避免被铁污染。2、试剂一和试剂二溶液不稳定，需现配现用，新配制的试剂只能当天使用。3.最低检出限为lmolL0