下呼吸道感染病原学.ppt

下呼吸道感染病原学的诊断进展下呼吸道感染病原学的诊断进展概 述 下呼吸道感染是威胁人类健康的主要疾病之一，感染性疾病致死者占全球死亡人数的三分之一，其中呼吸道感染居各类感染之首。明确下呼吸道感染的病原体对于指导抗生素使用，减少病原体产生耐药性和药物的副作用，缩短病程，降低费用具有重要意义。病原学诊断方法11 痰涂片革兰染色2 痰培养3 血培养4 胸水培养5 血清学检查和抗原检测6 经纤维支气管镜的保护性毛刷7 支气管肺泡灌洗8 聚合酶链反应（PCR）技术病原学诊断方法v痰涂片革兰染色（SGS）SGS是鉴别革兰阳性菌和阴性菌最简单的方法。尺可能在使用抗生素之前采集标本并在2h内送检。无痰患者可用高渗盐水雾化导入吸痰。v痰培养 痰涂片和痰培养常同时进行，定量培养能鉴别污染菌和感染菌，一般定量培养细菌数107CFU/ml（集落生成单位/ml）认为是感染菌，如连续2次以上分离到同一细菌也认为是感染菌。痰定量培养普通实验室很难开展，因此常采用半定量培养法，即标准4区划线接种法接种，4区细菌生长结果以1+，2+，3+，4+表示。痰培养阳性率25%50%。尽管如此，痰培养仍是目前最常用的诊断方法。v血培养 血培养若发现病原菌，其特异性较高，但敏感性仅为20%。目前认为轻中度CAP无需行血培养。v胸水培养 下呼吸道感染合并有胸腔积液收集胸水培养，胸水未发现病原菌，可行胸膜活检。但下呼吸道感染胸腔积液的发生率不到15%，其价值有限。v血清学检查和抗原检测 采用血清学检查，其抗体滴度升高4倍或4倍以上有意义。它用于回顾性和流行病学研究。v经纤维支气管镜的保护性毛刷技术 1979年，Wimberley发现顶端带有聚乙二醇堵塞的双层套管防污染效果最佳，体外实验防污染率达100%，该技术称为保护性毛刷技术（PSB）。保护性标本刷经纤维支气管镜采集标本，大幅度地减少污染的机会。保护性套管刷检，包括单套管毛刷、双套管毛刷、加塞或不加塞等办法，其中双套管加塞毛刷的效果最好。PSB敏感性和特异性，目前国际公认且被广泛使用的采样方法，我国1990年全国肺部感染会议已将其列为院内支气管-肺感染的病原学诊断方法。Heyland等将肺部感染病人分为不接受纤支镜检查和接受PSB或BAL两组，发现前者的抗生素使用量和死亡率均高于后者。PSB103CFU/ml的分离菌是病原菌，104CFU/ml认为是致病菌。BAL灌洗部位：通常在右中叶或舌叶，生理盐水，一般为37，室温下（25左右）生理盐水亦可应用。2550ml，总量100250ml，不应超过300ml。负压吸引压力约为25100mmHg，要防止负压过大过猛。回收量：中叶或舌叶灌洗回收量应在40%以上，下叶或其他肺叶为30%以上。内壁涂硅的容器或其他防止巨噬细胞贴壁的容器中，周围宜被冰水（-4）包围，在半小时内送至实验室，通常在23h内处理。Flanagan等建议使用BALF的革兰染色，若发现细胞内细菌，可以诊断肺炎，研究表明其特异性达90%。比较PSB和BAL，两者在细菌定量培养方面诊断价值相当，但在病原菌的快速诊断方面，BAL优于PSB。因此，患者已使用抗生素时建议采用BAL。目前认为，两者联合应用可以互补，较单独使用效果更好。v聚合酶链反应（PCR）技术 PCR技术具有敏感、特异的优点。较少时，可以用PCR技术大量扩增所选定的核酸序列，PCR检测不受抗生素影响，但不能区分是活动性还是潜伏性感染，是新近感染还是细菌定植。该方法还存在许多技术上的问题尚未解决。经纤维支气管镜采样 ，在肺 感染病原学诊断中具有重要的应用价值，适用于病原菌复杂的肺感染的诊断。总 结的经验治疗的经验治疗经验治疗经验治疗 在临床上常见的细菌感染治疗方案每要根据致病菌种类和药敏试验的结果来制定或/和修正给药方案，故病原学诊断对于合理应用抗生素具有重要的指导意义。但多数情况下在获得阳性培养包括血液、体液、组织液等和药敏结果前，临床医生须根据病史、症状、体征以确定感染部位、感染性质等，来制定用药方案，称之为经验治疗。2000-20012000-2001研究年度研究年度1313家医院共收集致病菌家医院共收集致病菌25542554株株耐药革兰阴性杆菌主要有：产超广谱内酰胺酶Extended-Spectrum Beta-Lactamases(ESBLs)的肺炎克雷伯菌大肠杆菌，具有多重耐药特性的铜绿假单胞菌、不动杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌，此外，耐氟康唑的念珠菌，耐药的结核杆菌的比例也在增加。诊断标准：1条主要标准，或2条次要标准 二、经验治疗不等于随意用药，二、经验治疗不等于随意用药，也必须遵循一定的原则如：也必须遵循一定的原则如：（1）病毒性疾病和发热原因不明者，病毒性疾病和发热原因不明者，不宜随意用不宜随意用抗生素抗生素。除病情严重并怀疑为细菌感染外，否则可使临床症状不典型和病原菌不易被检出，以致延误正确诊断与治疗。上呼吸道感染以及咽痛、咽峡炎，大部分是病毒感染所致，多不必应用抗菌药物。（2）足量的药物，足够的疗程足量的药物，足够的疗程。剂量过小，不但无治疗作用，反易使细菌产生耐药性；剂量过大，不仅造成浪费，还会带来严重的毒副作用。疗程过短易使疾病复发或转为慢性。可以联合二种抗菌药物即可，不必三药联用或四药联用（结核除外）。（3 3）应尽量避免局部应用抗菌药，应尽量避免局部应用抗菌药，因其易发生过敏反应和耐药菌因其易发生过敏反应和耐药菌 的产生。的产生。（4 4）应严格掌握预防用药的适应证）应严格掌握预防用药的适应证 （术前预防用药等）。（术前预防用药等）。（5 5）要注意肝肾功能损害时抗菌药的）要注意肝肾功能损害时抗菌药的 选择选择 。三、经验治疗在临床上的应用三、经验治疗在临床上的应用A、根据患者的详细病史、流行病学、感染的症状、体征推测可能引起感染的病原菌及感染的诊断，并尽早给于有效的抗感染药物治疗。B、血行感染绝大多数为一种病原微生物所引起，病原种类与患者发病时所在场所如医院内或外、年龄、原来健康状况，原发病灶和入侵途径均有关，在培养未获得阳性结果前可据此推测病原菌的种类而给予治疗。C、肺炎的致病微生物常不易明确获知，痰液涂片和培养虽对诊断有助，但关键在于取得不为唾液污染的合适标本。D、尿路感染多数为革兰阴性杆菌所引起，其中大肠埃希菌最为常见，初发病例尤然；其他尚可有肺炎克雷伯菌、肠杆菌属、肠球菌属、铜绿假单胞菌、葡萄球菌属、沙雷菌属等。E、临床上细菌性脑膜炎CSF培养的阳性率很低，且培养需要一定时间，脑膜炎为一急性危重临床疾病，在留取标本后尽早治疗，故经验治疗特别重要。总 结1 重视下呼吸道感染病原学的诊断重视下呼吸道感染病原学的诊断2 合理应用抗菌素防止耐药菌产生合理应用抗菌素防止耐药菌产生谢谢!