糖和苷类药物的分析.ppt

药物结构与性质、分析方法的关系药物结构与性质、分析方法的关系 本类药物主要有本类药物主要有葡萄糖葡萄糖 单糖单糖 蔗糖蔗糖乳糖乳糖 双糖双糖淀粉淀粉多糖多糖赋形剂和矫味剂赋形剂和矫味剂CH2OHOHOHOHOH葡萄糖（葡萄糖（glucose）无色结晶或白色结晶无色结晶或白色结晶性性或颗粒性粉末；无嗅，或颗粒性粉末；无嗅，味甜味甜 OHOOHOHOHOOOHOHOHHO蔗糖（蔗糖（sucrose）无色结晶或白色结晶性无色结晶或白色结晶性的松散的松散粉末；无嗅，味甜粉末；无嗅，味甜 OOHOHOHOHOOHOOHOHOH乳糖（乳糖（sucrose）白色的结晶性颗粒或粉白色的结晶性颗粒或粉末；无嗅，味微甜。末；无嗅，味微甜。1.1.溶解性：单糖、双糖均易溶于水，微溶于乙醇溶解性：单糖、双糖均易溶于水，微溶于乙醇，不溶于氯仿或乙醚等有机溶剂；多糖在冷水或，不溶于氯仿或乙醚等有机溶剂；多糖在冷水或乙醇中均不溶解。乙醇中均不溶解。2.2.旋光性：单糖和双分子中有不对称碳原子，均旋光性：单糖和双分子中有不对称碳原子，均具有一定的比旋度，可用于鉴别、纯度检查及含具有一定的比旋度，可用于鉴别、纯度检查及含量测定。量测定。3.3.还原性：单糖或含有半缩醛基的双糖分子结构还原性：单糖或含有半缩醛基的双糖分子结构中，均有醛基或酮基，都具有还原性。中，均有醛基或酮基，都具有还原性。.单糖于水溶液中主要呈半缩醛的环状结构。单糖于水溶液中主要呈半缩醛的环状结构。二、鉴别试验二、鉴别试验 （一）灼烧试验（一）灼烧试验（二）（二）FehlingFehling反应反应（三）蔗糖的鉴别（三）蔗糖的鉴别 （四）红外吸收光谱法（四）红外吸收光谱法 第九章 糖、苷类药物分析 二、鉴别试验二、鉴别试验 （一）灼烧试验（一）灼烧试验蔗糖的灼烧鉴别：取本品，用直火加热，先熔融蔗糖的灼烧鉴别：取本品，用直火加热，先熔融膨胀，后燃烧并发生焦糖臭，遗留多量的炭。膨胀，后燃烧并发生焦糖臭，遗留多量的炭。（二）（二）FehlingFehling反应反应FehlingFehling反应是在反应是在FehlingFehling试剂试剂（碱性酒石酸铜试（碱性酒石酸铜试液）液）中，具还原性的中，具还原性的糖与铜离子糖与铜离子发生氧化发生氧化-还原还原反应，生成反应，生成红色红色的氧化亚铜沉淀。的氧化亚铜沉淀。（三）蔗糖的鉴别（三）蔗糖的鉴别 取本品适量，加取本品适量，加0.050.05mol/Lmol/L硫酸溶液，煮沸后，硫酸溶液，煮沸后，用用0.10.1mol/Lmol/L氢氧化钠溶液中和，再加碱性酒石氢氧化钠溶液中和，再加碱性酒石酸铜试液，加热，即生成氧化亚铜的红色沉淀。酸铜试液，加热，即生成氧化亚铜的红色沉淀。（四）红外吸收光谱法（四）红外吸收光谱法 中国药典规定本品的红外光吸收图谱应与对照中国药典规定本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致。的图谱一致。(4)比旋度比旋度蔗糖：不得少于蔗糖：不得少于+66（10%水溶液）水溶液）乳糖：乳糖：+52.0+52.6（10%水溶液，并水溶液，并100ml中加氨试液中加氨试液0.2ml）无水葡萄糖：无水葡萄糖：+52.6+53.2葡萄糖：葡萄糖：+52.5+53（10%水溶液，并水溶液，并100ml中加氨试液中加氨试液0.2ml）第九章 糖、苷类药物分析 三、杂质检查三、杂质检查 （一）葡萄糖一般检查项目（一）葡萄糖一般检查项目（二）葡萄糖注射液的检查项（二）葡萄糖注射液的检查项（三）蔗糖的检查（三）蔗糖的检查（四）乳糖的蛋白质检查（四）乳糖的蛋白质检查三、杂质检查（一）葡萄糖一般检查项目一）葡萄糖一般检查项目 1.1.酸度、氯化物和硫酸盐酸度、氯化物和硫酸盐 ：检查目的：检查葡萄糖制备过程中由水解试剂而引入的杂质检查目的：检查葡萄糖制备过程中由水解试剂而引入的杂质2.2.溶液的澄清度与颜色：溶液的澄清度与颜色：检查目的：检查水中不溶性物质或有色杂质检查目的：检查水中不溶性物质或有色杂质 3.3.乙醇溶液的澄清度：乙醇溶液的澄清度：检查目的：检查醇不溶性杂质，如糊精、蛋白质、脂肪等检查目的：检查醇不溶性杂质，如糊精、蛋白质、脂肪等 4.亚硫酸盐与可溶性淀粉亚硫酸盐与可溶性淀粉：检查目的：检查制备葡萄糖原料时，使用的酸中可能带入的检查目的：检查制备葡萄糖原料时，使用的酸中可能带入的亚硫酸盐，可溶性淀粉为引入的中间体亚硫酸盐，可溶性淀粉为引入的中间体 第九章 糖、苷类药物分析 三、杂质检查（二）葡萄糖注射液的检查项 1pH值：应为3.25.5 25-羟甲基糠醛：5-HMF5-HMF的聚合物，有色（二）葡萄糖的特殊检查项目二）葡萄糖的特殊检查项目第九章 糖、苷类药物分析 葡萄糖易分解产生葡萄糖易分解产生5-5-羟甲基糠醛（羟甲基糠醛（5-5-Hydroxymethyl furfuralHydroxymethyl furfural，简称简称5-5-HMFHMF），），其本身是无色的，其本身是无色的，它可再分解为乙酰丙酸与甲它可再分解为乙酰丙酸与甲酸或聚合，其聚合物为一种有色物质。葡萄糖酸或聚合，其聚合物为一种有色物质。葡萄糖遇强热使溶液变黄，至少有一部分颜色是由于遇强热使溶液变黄，至少有一部分颜色是由于葡萄糖的分解产物葡萄糖的分解产物5-5-羟甲基糠醛的聚合物作用羟甲基糠醛的聚合物作用所致；而且葡萄糖注射液的色泽深浅与所致；而且葡萄糖注射液的色泽深浅与5-5-羟甲羟甲基糠醛产生的量成正比。因此，可以用基糠醛产生的量成正比。因此，可以用5-5-羟甲羟甲基糠醛的形成速度来检查葡萄糖的分解速度。基糠醛的形成速度来检查葡萄糖的分解速度。（三）蔗糖的检查（三）蔗糖的检查 1.1.蔗糖中的还原糖蔗糖中的还原糖 原理：以碱性枸橼酸铜氧化蔗糖中的还原糖，在于供原理：以碱性枸橼酸铜氧化蔗糖中的还原糖，在于供试液中加入定量、过量的碱性枸橼酸铜，使还原糖与试液中加入定量、过量的碱性枸橼酸铜，使还原糖与碱性枸橼酸铜反应，剩余的碱性枸橼酸铜将碱性枸橼酸铜反应，剩余的碱性枸橼酸铜将KIKI还原为还原为I I2 2，后者用硫代硫酸钠滴定。后者用硫代硫酸钠滴定。2.蔗糖中的钙盐蔗糖中的钙盐原理：利用钙离子可与草酸形成草酸钙的沉淀，供试原理：利用钙离子可与草酸形成草酸钙的沉淀，供试液形成的沉淀与限量的标准钙离子在相同条件下形成液形成的沉淀与限量的标准钙离子在相同条件下形成的沉淀比较，不得更浓。的沉淀比较，不得更浓。（四）乳糖的蛋白质检查（四）乳糖的蛋白质检查 来源：未除去的动物乳汁中的蛋白质来源：未除去的动物乳汁中的蛋白质原理；利用蛋白质类杂质遇硝酸汞试液产生原理；利用蛋白质类杂质遇硝酸汞试液产生的白色絮状沉淀的性质，可进行乳糖的特殊的白色絮状沉淀的性质，可进行乳糖的特殊杂质检查。杂质检查。方法：取本品方法：取本品5.05.0g g，加热水加热水2525m1m1溶解后，放溶解后，放冷，加硝酸汞试液冷，加硝酸汞试液0.50.5mLmL，5 5分钟内不得生成分钟内不得生成絮状沉淀。絮状沉淀。葡萄糖葡萄糖 手性碳原子，具旋光性。手性碳原子，具旋光性。鉴别鉴别含量测定含量测定纯度纯度CLD20测定旋光度，除另有规定外，测定温度测定旋光度，除另有规定外，测定温度20，测定管长度，测定管长度2dm，物质浓度以物质浓度以C（g/ml）表示，则：表示，则：CLD20即即 20100DLC如果已知被测物质的比旋度如果已知被测物质的比旋度,根据测量根据测量得到的比旋度得到的比旋度,由上式即可计算出被测物由上式即可计算出被测物质的百分浓度。质的百分浓度。（二）葡萄糖注射液的含量测定（二）葡萄糖注射液的含量测定1 1样品浓度与旋光度的关系样品浓度与旋光度的关系 样品浓度与旋光度的关系推导如下：样品浓度与旋光度的关系推导如下：式中式中为比旋度；为比旋度；l l为测定管长度，为测定管长度，dmdm；为测得的旋光度；为测得的旋光度；C C1 1为每为每100100mlml溶液中含有葡萄糖的溶液中含有葡萄糖的重量，重量，g g（按干燥品或无水物计按干燥品或无水物计算）算）C C为每为每100100mlml溶液中含溶液中含有无水葡萄糖的重量，有无水葡萄糖的重量，g g（按干燥品或无水物按干燥品或无水物计算）计算）198.17为含水葡萄糖的分子量，为含水葡萄糖的分子量，180.16为无水葡萄糖的分子量。为无水葡萄糖的分子量。由上式可计算出由上式可计算出100100mlml供试供试品溶液中含一分子结晶水品溶液中含一分子结晶水葡萄葡萄(C C6 6H H1212O O6 6H H2 2O)O)的质量的质量(g)g)。葡萄糖注射液含量测定的方法葡萄糖注射液含量测定的方法 精密量取本品适量（约相当于葡萄糖精密量取本品适量（约相当于葡萄糖1010g g），），置置100100mlml量瓶中，加氨试液量瓶中，加氨试液0.20.2mlml（10%10%或或10%10%以下规格的本品可直接取样测以下规格的本品可直接取样测定），用水稀释至刻度，摇匀，静置定），用水稀释至刻度，摇匀，静置1010分分钟依法测定旋光度，与钟依法测定旋光度，与2.08522.0852相乘，即得相乘，即得供试品中含有供试品中含有C C6 6H H12120 06 6H H2 20 0的重量的重量(g)g)。【实例分析实例分析】葡萄糖注射液的含量测定葡萄糖注射液的含量测定精密量取本品适量（约相当于葡萄糖精密量取本品适量（约相当于葡萄糖1010g g），），置置100100mlml量瓶中，加氨试液量瓶中，加氨试液0.20.2mlml（1010或或1010以下以下规格的本品可直接取样测定），用水稀释至刻度，规格的本品可直接取样测定），用水稀释至刻度，摇匀，静置摇匀，静置1010分钟，依法测定旋光度，与分钟，依法测定旋光度，与2.08522.0852相乘，即得供试品中含有相乘，即得供试品中含有C C6 6H H1212O O6 6H H2 2O O的重量的重量(g)g)。为什么加氨水？要测定规格为为什么加氨水？要测定规格为1010ml2gml2g的葡萄糖的葡萄糖注射液含量，需要加氨水吗？若所测得的旋光度注射液含量，需要加氨水吗？若所测得的旋光度为为4.7824.782，求含葡萄糖的百分含量（，求含葡萄糖的百分含量（g/100mlg/100ml）。）。分析药用葡萄糖有药用葡萄糖有、两种互变异构体，在水溶液中平两种互变异构体，在水溶液中平衡状态：衡状态：CCOHHCHHOCOHHCHCH2OHOHHOCCOHHCHHOCOHHCOHHCH2OHOCCOHHCHHOCOHHCHCH2OHHHOO%364.11320占葡萄糖DD%024.075.5220占葡萄糖醛式DD%647.1920占葡萄糖DDH其中其中V V为取样体积为取样体积 由于例中葡萄糖注射液的浓度为由于例中葡萄糖注射液的浓度为20%20%，测，测定时需稀释，新配置的葡萄糖溶液由于变定时需稀释，新配置的葡萄糖溶液由于变旋未达平衡，所测旋光度不稳定，所以要旋未达平衡，所测旋光度不稳定，所以要加入少量的氨试液，可使变旋加速而达到加入少量的氨试液，可使变旋加速而达到平衡。平衡。100%=19.94%（g/ml）V1001000852.2百分含量百分含量%=%=【课堂活动课堂活动】是否可以用是否可以用5 5羟甲基糠醛的形成速羟甲基糠醛的形成速度来检查葡萄糖的分解速度？度来检查葡萄糖的分解速度？葡萄糖易分解产生葡萄糖易分解产生5-5-羟甲基糠醛（羟甲基糠醛（5-5-Hydroxymethyl Hydroxymethyl furfuralfurfural，简称简称5-5-HMFHMF），），5-5-羟甲基糠醛再分解为乙酰丙羟甲基糠醛再分解为乙酰丙酸与甲酸或聚合，其聚合物为一种有色物质。酸与甲酸或聚合，其聚合物为一种有色物质。5-5-羟甲基糠羟甲基糠醛的量可以反映葡萄糖的分解速度。因此，可以用醛的量可以反映葡萄糖的分解速度。因此，可以用5 5羟羟甲基糠醛的形成速度来检查葡萄糖的分解速度甲基糠醛的形成速度来检查葡萄糖