血小板检测 第二节 血小板检验.ppt

概述概述血小板计数血小板计数血小板形态学检查血小板形态学检查。血小板产量血小板产量血小板寿命血小板寿命血小板作用血小板作用血小板调节血小板调节.血小板生成血小板生成 1、促进、促进PLT生成的因子：生成的因子：IL-1、IL-3、IL-6、IL-7 (WBC介素介素-1、3、6、7)粒粒-单细胞集落刺激因子（单细胞集落刺激因子（GM-CSF）巨核细胞集落刺激因子（巨核细胞集落刺激因子（Meg-CSF）血小板生成素（血小板生成素（TPO）2、抑制、抑制PLT生成的因子：生成的因子：乳铁蛋白、酸性异铁蛋白、前列腺素乳铁蛋白、酸性异铁蛋白、前列腺素E、干扰素等、干扰素等 通过上述调节因子来调节通过上述调节因子来调节Plt生成与破坏的动态平衡。生成与破坏的动态平衡。多能干细胞多能干细胞巨核细胞系巨核细胞系 祖细胞祖细胞原巨核细胞原巨核细胞幼巨核细胞幼巨核细胞 Plt （1.52.5天后释放至血循环中）天后释放至血循环中）颗粒型颗粒型巨核细胞巨核细胞 血循环血循环自由交换自由交换 脾脾 窦窦 胞浆脱落胞浆脱落TPO（Plt生成素）生成素）GM-CSF、IL-3、Meg-CSF 2/3 裸核裸核 GM-CSF IL-3分化分化髓系干细胞髓系干细胞分化分化 IL-1、IL-6、IL-7GM-CSF、IL-3、Meg-CSF GM-CSF、IL-3、Meg-CSF 发育发育 产产PLT型型巨核细胞巨核细胞 l每天产生血小板的量相当于每升血每天产生血小板的量相当于每升血中增加中增加35109个个l约有约有714天（生物半衰期只有天（生物半衰期只有3天）天）止血过程中的作用：止血过程中的作用：主要与血管共同完主要与血管共同完成，包括粘附、聚集功能和释放反应等成，包括粘附、聚集功能和释放反应等凝血过程中的作用：凝血过程中的作用：主要依靠血小板的主要依靠血小板的各种因子来完成，其中最重要的是血小各种因子来完成，其中最重要的是血小板第板第3因子（因子（PF3）方法学评价方法学评价临床意义临床意义血小板计数血小板计数（目视计数法）。l原原 理：理：l与白细胞计数基与白细胞计数基本相同。本相同。l不同点：计数中不同点：计数中央大方格内央大方格内5 5个个中方格的中方格的PltPlt数。数。l国内最常用的血小板直接计数法国内最常用的血小板直接计数法:l1、草酸铵溶血法草酸铵溶血法（首选）（首选）l2、复方尿素溶血法复方尿素溶血法（次选）（次选）l无论是自动血液细胞分析仪法或显微镜无论是自动血液细胞分析仪法或显微镜计数法，多以计数法，多以草酸铵溶血法草酸铵溶血法作为作为参考方参考方法法，国内将其作为首选方法。，国内将其作为首选方法。l操作：操作：1、取、取20l血液加入血液加入o.38ml草酸铵稀释液中，草酸铵稀释液中，混匀后，静止混匀后，静止10min；2、将混悬液充入计数室，将计数室置于保、将混悬液充入计数室，将计数室置于保湿平皿内静止湿平皿内静止1520min；3、在高倍显微镜、在高倍显微镜(或在放大或在放大100倍位相显微倍位相显微镜镜)下精确计数中央大方格中下精确计数中央大方格中5个中方格个中方格内的血小板数。内的血小板数。l注意事项：注意事项：1全部器材和稀释液要特别清洁，血小板全部器材和稀释液要特别清洁，血小板稀释液空白计数值应为稀释液空白计数值应为0。2刺血一定要深刺血一定要深(3mm)，血液应自然流出，血液应自然流出，避免挤压，动作要快，以防止血小板避免挤压，动作要快，以防止血小板聚集。聚集。3必须充分混匀后，滴入计数池中，必须充分混匀后，滴入计数池中，至少至少静止静止15min15min（PltPlt完全完全下沉下沉），才能进），才能进行计数行计数。并要求在采血后。并要求在采血后1h内计数完内计数完毕，否则毕，否则PLT结果降低结果降低;4计数时光线要适中，不可太强，应随时计数时光线要适中，不可太强，应随时旋转显微镜微调，注意与细胞碎屑、旋转显微镜微调，注意与细胞碎屑、微生物、结晶等杂物鉴别。微生物、结晶等杂物鉴别。目视目视 计数计数 法法血细胞分析仪法血细胞分析仪法.目目视视显显微微镜镜计计数数法法普普通通显显微微镜镜法法相相差差显显微微镜镜法法l优点：优点：重复性好，适于临床使用。重复性好，适于临床使用。l 缺点：缺点：仪器不能区分仪器不能区分PLT与其他类似大与其他类似大小的物质小的物质,如：如：RBC碎片、碎片、WBC碎片、碎片、灰尘等杂物灰尘等杂物（原因后述），（原因后述），因此，有时仍需因此，有时仍需目视法做校正，目视法做校正，因而国外仍然将目视法（特因而国外仍然将目视法（特别是相差显微镜法）作为参考方法别是相差显微镜法）作为参考方法。生理性生理性病理性病理性参考值参考值l普通显微镜计数法：普通显微镜计数法：l （100100300300）10109 9/L/Ll正常人正常人Plt一天内可有一天内可有610%的波动表现为：的波动表现为：低低 高高早早 晨晨下下 午午春春 季季冬冬 季季平原居民平原居民高原居民高原居民月月 经经 前前月月 经经 后后 高高 低低妊娠中晚期妊娠中晚期分娩后分娩后运运 动动 后后休息后休息后动动 脉脉 血血静脉血静脉血静静 脉脉 血血 cap血血10%1.Plt：在临床上，在临床上，除创伤外，除创伤外，Plt是引起出血的常见原因是引起出血的常见原因，当，当Plt50109/L时，可有出血症状，常见的疾病有：时，可有出血症状，常见的疾病有：1）Plt生成障碍生成障碍：如如急性白血病、再障；急性白血病、再障；2）Plt破坏过多破坏过多：如如原发性血小板减少性原发性血小板减少性 紫癜（紫癜（ITP）、脾亢、）、脾亢、SLE；3）Plt消耗增多消耗增多：如如DIC、血栓性血小、血栓性血小 板减少紫癜；板减少紫癜；1.Plt：见于见于：1）骨髓增生性疾病骨髓增生性疾病：慢粒、真性：慢粒、真性RBC 增多症；增多症；2）原发性血小板增多症原发性血小板增多症；2 Plt：Plt400109/L2 Plt：Plt400109/L3）急性大出血、急性溶血、急性急性大出血、急性溶血、急性 化脓性感染；化脓性感染；4）脾切除术后脾切除术后；1 血小板形态的检验重要性血小板形态的检验重要性2 镜下血小板形态观察的内容镜下血小板形态观察的内容3 血小板形态变化及意义血小板形态变化及意义.l血小板的形态与功能密切相关。通过血血小板的形态与功能密切相关。通过血小板形态的检验，对疾病的诊断、鉴别小板形态的检验，对疾病的诊断、鉴别诊断以及发病机制的探讨，都有十分重诊断以及发病机制的探讨，都有十分重要的意义。要的意义。l先低倍镜选着色及分布良好的部位，转油镜检查。先低倍镜选着色及分布良好的部位，转油镜检查。l观察的内容：观察的内容：1、PLT数量、大小如何；数量、大小如何；2、PLT形态有无改变，胞质染色是否正常，颗粒有无、形态有无改变，胞质染色是否正常，颗粒有无、多少、粗细、分布情况，有无空泡等。且应估计正多少、粗细、分布情况，有无空泡等。且应估计正常和异常常和异常PLT的数量；的数量；3、血小板的分布情况；、血小板的分布情况；4、必要时作、必要时作PLT分类分类(根据其大小和形态根据其大小和形态)计数，一般计数，一般应计数应计数500个个PLT，统计各型比值。，统计各型比值。1大小的变化大小的变化2形态的变化形态的变化 3血小板分布情况血小板分布情况.正正 常常 血血 小小 板板小小 型型 血血 小小 板板大大 型型 血血 小小 板板巨大型血小板巨大型血小板.l直径直径23m，正常人约占，正常人约占44.3一一49见于：见于：ITP、脾亢、溶贫，缺铁性贫血等；、脾亢、溶贫，缺铁性贫血等；在正常人末梢血中有一定比例的小、大、巨型在正常人末梢血中有一定比例的小、大、巨型PLT；小型小型PLT比大型比大型PLT更富有聚集作用，故功能活跃。更富有聚集作用，故功能活跃。而大型或巨大而大型或巨大 型型PLT常无粘附和聚集功能。常无粘附和聚集功能。平均直径平均直径1.5m，正常约占，正常约占3347见于见于:再障等再障等平均直径平均直径4.6m，正常约占，正常约占816提示：骨髓造提示：骨髓造PLT功能旺盛，但有成熟功能旺盛，但有成熟障碍、破坏加速的表现障碍、破坏加速的表现l平均直径大于平均直径大于7.5 m，正常约占，正常约占o.72l见于血小板无力症、血管性假性血友病、继发性血小板见于血小板无力症、血管性假性血友病、继发性血小板增多，偶见增多，偶见ITP。成熟型血小板成熟型血小板幼稚型血小板幼稚型血小板病理性幼稚型血小板病理性幼稚型血小板.衰老型和病理刺激型血小板衰老型和病理刺激型血小板无颗粒型血小板无颗粒型血小板血小板形态变化的意义血小板形态变化的意义l呈圆形、椭圆形或不规则形，胞质向外伸出多个丝呈圆形、椭圆形或不规则形，胞质向外伸出多个丝状树突，胞浆呈淡蓝色，含有许多紫红色颗粒。状树突，胞浆呈淡蓝色，含有许多紫红色颗粒。l正常人约占正常人约占9090以上以上l正常占正常占o.55l见于急性失血之后及血小板无力症等。见于急性失血之后及血小板无力症等。l体积较大，呈圆形，胞膜无丝状体积较大，呈圆形，胞膜无丝状“树突树突”伸出，伸出，胞质蓝色，颗粒缺乏，为未成热巨核细胞所脱落；胞质蓝色，颗粒缺乏，为未成热巨核细胞所脱落；l正常人正常人见不到。见不到。l：见于特发性和反应性血小板病。见于特发性和反应性血小板病。l当骨髓巨核细胞增生时，尤其在特发性血小板减当骨髓巨核细胞增生时，尤其在特发性血小板减少性紫癜出现少性紫癜出现PLTPLT减少危象和粒细胞性白血病时，减少危象和粒细胞性白血病时，可以见到大量蓝色和巨大的血小扳。可以见到大量蓝色和巨大的血小扳。l慢性中性粒细胞性白血病慢性中性粒细胞性白血病l特发性血小板减少性紫癜特发性血小板减少性紫癜l衰老型：衰老型：增多常见于恶性贫血。增多常见于恶性贫血。l病理刺激型：病理刺激型：血小板直径血小板直径2030 m，形，形态多变，胞质蓝色或紫蓝色、颗粒多、态多变，胞质蓝色或紫蓝色、颗粒多、大小相似；大小相似；l正常人偶见；正常人偶见；l增多常见于骨髓受到严重刺激、血小板增多常见于骨髓受到严重刺激、血小板无力症等。无力症等。l见于灰血小板综合症（提示骨髓纤维化）见于灰血小板综合症（提示骨髓纤维化）l正常未见正常未见正常正常l正常人也可见到少量形态不规则或畸形正常人也可见到少量形态不规则或畸形的血小板，但所占比值一般少于的血小板，但所占比值一般少于2。l由于影响血小板形态的因素很多，各种由于影响血小板形态的因素很多，各种改变又无特异性，因此只有异常血小板改变又无特异性，因此只有异常血小板的比值超过的比值超过10时才考虑它的临床意义。时才考虑它的临床意义。.l功能正常的血小板因有树突相互粘附凝集在一起，功能正常的血小板因有树突相互粘附凝集在一起，常见常见35成群、成堆、成片出现，散在血小板极成群、成堆、成片出现，散在血小板极少见聚集与散在血小板之比为少见聚集与散在血小板之比为201。l在冠心病、原发性血小板增多症在冠心病、原发性血小板增多症(ETET)或继发性血或继发性血小板增多症等病变时，小板增多症等病变时，PLTPLT可可4050个成群成堆出个成群成堆出现，甚至超过现，甚至超过100个，数百数千个个，数百数千个PLTPLT成群成堆成成群成堆成片聚集一起占满整个油镜视野。片聚集一起占满整个油镜视野。血小板过度聚集出现，提示血小板过度聚集出现，提示PLTPLT功能异常，功能异常，常引起局灶性或全身性的栓塞病理改变。常引起局灶性或全身性的栓塞病理改变。l在再障、特发性血小板减少性紫癜时，在再障、特发性血小板减少性紫癜时，PLTPLT粘附聚集减少。粘附聚集减少。l在血小板无力症时，血小板散在分布，则不出现聚集现象。在血小板无力症时，血小板散在分布，则不出现聚集现象。l出现血小板散在分布，提示出现血小板散在分布，提示PLTPLT功能异常，常发生出血现象。功能异常，常发生出血现象。多能干细胞多能干细胞巨核