第4章IDNA的复制.ppt
图图4-1 DNA复制可能的三种方式以及复制可能的三种方式以及Meselson和和Stahl实验的可能结果实验的可能结果图图4-2 Meselson 和和Stahl实验的实际结果实验的实际结果 Herbert Taylor 在植物根尖细胞中使用放射自显影证明，真核细胞DNA的复制方式也是半保留。图图4-3 证明证明DNA复制的方向始终是复制的方向始终是53的末端终止实验的末端终止实验 图图4-10 DNA的半不连续复制的半不连续复制 Okazaki fragmentLeading strandLagging strand：(topoisomerase)与超螺旋松驰有关，改变DNA拓扑性质，松驰超螺旋，有利于复制叉的前进，有型和型，原核、真核中均有。DNA polI催化的缺口平移催化的缺口平移 图图4-13 DNA pol的聚合和校对的聚合和校对 fingerthumbpalm图图4-14 E.coli DNA polIII全酶的结构模型全酶的结构模型 图图4-27 端粒酶的作用机理端粒酶的作用机理 Figure 1 Schematic diagram of adeno-associated virus(AAV).(a)The structure of the wild-type AAV.(b)The gene-delivery vector based on AAV.The viral genome is replaced by an expression cassette,which usually consists of a promoter,transgene and polyA(pA)tail.(c)Diagram of AAV-hTERT-hIFN-.(d)Diagram of the two ORF rep and cap.Cap encodes three capsid proteins VP1,VP2 and VP3.The arrows mark sites of the specific ligands insertion(numbers are the amino acid positions N-terminal of the insertion).Chin Sci Bulletin,2007,52:1590-1599.Promoter Transgene pA ITR ITR a c hTERT hIFN-pA ITR ITR ITR REP 447 261 381 534 573 VP1 VP2 VP3 587 CAP ITR b d rep cap ITR ITR Oncogene(2004)23,457-464nDNA复制过程的三个阶段nDNA复制的起始阶段，包括起始点，复制方向以及引发体的形成。nDNA链的延长，包括前导链及随从链的形成和切除RNA引物后填补空缺及连接冈崎片段。nDNA复制的终止阶段。（一）DNA复制的起始阶段n复制是从DNA分子上的特定部位开始的，即复制起始点(origin of replication)常用ori或o表示，复制的基本单位为复制子或复制单元(replicon)。n在原核细胞中只有一个复制起始点，一个复制子。n在真核生物中复制是从许多起始点同时开始的，即有多个复制子。DNA复制起始点的结构特性n大肠杆菌Ori由422个核苷酸组成，是一系列对称排列的反向重复序列，即回文结构(palindrome)。n有些生物复制起始点Ori是富含AT的区段。这些特殊的结构对于在DNA复制起始过程中参与的酶和许多蛋白质分子的识别和结合都是必须的。图图4-28 E.coli的的OriC结构结构(一一)DNA复制的起始E.Coli DNA复制起始包括对其复制起始区OriC的识别，以及引发体(primosome)的形成。nDNA双螺旋的解旋由多种酶来完成的nDNA解链酶：水解ATP获能解开双链DNAn单链结合蛋白（SSB蛋白）：保持单链结构n引发酶引发酶(RNA聚合酶)：合成RNA引物n随从链是由引发体来完成的图图4-29 E.coli DNA复制过程中引发体的形成复制过程中引发体的形成（二）DNA链的延长n复制的延伸在复制体(replisome)内进行。nDNA的复制实际上就是以DNA为模板在DNA聚合酶作用下，将四种dNTP聚合成DNA的过程。n过程：复制体的形成 前导链合成 后随链合成 后随链合成与前导链合成之间的协调。图图4-30 E.coli DNA复制过程中复制体的形成复制过程中复制体的形成 图图4-31 E.coli DNA复制的延伸复制的延伸（三）DNA复制的终止阶段n E.coli DNA具有复制终止位点Ter 位点，此处可以结合一种特异的蛋白质分子叫做Tus(terminator utilization substance)，通过阻止Dna B解链酶(Helicase)的解链活性而终止复制。图图4-32 E.coli DNA复制终止区的结构复制终止区的结构 滚环复制滚环复制D环复制图环复制图真核与原核生物DNA复制的特点(差别)n染色质和核小体结构对DNA复制的影响n复制叉移动的速度远远低于原核细胞n真核生物是多点复制，具多个复制起始区，原核生物是单点复制。n冈崎片段的长度短于原核细胞n复制严格限制在细胞周期的S期n真核生物在完成全部复制之前，各个起始点上DNA的复制不能再开始；原核生物起始点上可连续开始新的DNA复制。n真核生物线性DNA末端具有端粒结构。图图4-40（1）逆转录病毒的结构逆转录病毒的结构图图4-40（2）逆转录病毒的详细结构逆转录病毒的详细结构 图图4-41 逆转录病毒基因组的结构逆转录病毒基因组的结构 图图4-42 HIV的生活史的生活史 图图4-43 HIV与宿主细胞的附着与宿主细胞的附着 图图4-44 逆转录病毒基因组逆转录的详细过程逆转录病毒基因组逆转录的详细过程 图图4-45 逆转录病毒基因组的逆转录结果逆转录病毒基因组的逆转录结果 图图4-46 原病毒原病毒DNA进入细胞核的机理进入细胞核的机理
