饮料中霉菌酵母菌的检测.ppt

饮料霉菌和酵母菌检测实验目的能阐述真菌的形态特征和生物学特征能阐述食品霉菌和酵母菌检验的基本流程和注意事项能阐述真菌毒素的危害和常见的检验方法能阐述真菌产毒的影响因素和防治措施实验材料1）器材250mL锥形瓶2个 试管2个 1mL吸量管3个 20mL吸量管1个 10mL吸量管1个 100mL量筒1个 玻璃棒 平皿8个 电炉 洗耳球 250mL烧杯1个 天平 试管架 恒温箱（25-28）酒精灯 空白载玻片 盖玻片 接种针等2)培养基和试剂马铃薯-葡萄糖琼脂培养基、灭菌蒸馏水等实验流程检样报告菌落计数每皿中加入15-20mL马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基，281选择2-3个适宜稀释度的样品匀液，各取1mL分别加入无菌培养皿内10倍系列稀释25g（mL)样品+225mL无菌蒸馏水，均质实验步骤1.样品的稀释（1）以无菌吸管吸取25mL样品至承有225mL无菌蒸馏水的锥形瓶中，充分混匀、制成1:10的样品匀液。（2）用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，注入含有9ml灭菌蒸馏水的吸管内，充分震荡做成1：100的均匀稀释液。2023-11-132.梯度稀释取1mL1:10稀释液注入含有9mL无菌水的试管中，另取一支1mL无菌吸管反复吹息，此液为1:100稀释液。按照此操作方法，制备10倍稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用一次1mL无菌吸管。根据污染状况的估计，选择2至3个适宜的稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），在进行10倍递增稀释的同时，每个稀释度分别吸取1mL样品匀液于2个无菌平皿中。同时分别吸取1mL样品稀释度加入2个平皿作空白对照。2023-11-133.溶解培养基及时将15至20mL的马铃薯-葡萄糖琼脂培养基倾注平皿中，并转动平皿使其混合均匀。4.培养待培养基凝固后，将平板倒置，281培养5d，观察并记录5.菌落计数 肉眼观察，记录各稀释倍数和相应的霉菌和酵母菌数，以菌落形成单位CFU表示。2023-11-13实验结果稀释度稀释度平板平板1(CFU)1(CFU)平板平板2(CFU)2(CFU)平均值平均值(CFU)(CFU)稀释度选择稀释度选择1 1酵母酵母菌菌多不可计多不可计多不可计多不可计多不可计多不可计霉菌霉菌1 11 11 11010-1-1酵母酵母菌菌多不可计多不可计多不可计多不可计多不可计多不可计霉菌霉菌0 00 00 01010-2-2酵母酵母菌菌232232362362297297霉菌霉菌0 00 00 0空白空白0 00 00 0酵母菌数报告酵母菌数报告值（值（cfu/mLcfu/mL）297297100=29700100=2970030000=3.030000=3.010104 41010霉菌数报告值霉菌数报告值（cfu/mLcfu/mL）1 11=1.01=1.010102023-11-1310-110-1稀释度为1稀释度为12023-11-1310-210-2空白2023-11-13实验结论根据实验结果可知，我们组空白实验没有长菌，说明无菌操作做的很完善。根据国标GB19296-2003可知，霉菌含量10cfu/mL，酵母菌10cfu/mL可知，酵母菌含量3.0104cfu/mL大于10cfu/mL不符合国标规定，霉菌1.0cfu/mL10cfu/mL符合。2023-11-13