酚黄肽半衰期与分布容积的测定.ppt

酚磺肽（酚磺肽（PSP）半衰期）半衰期及分布容积的测定及分布容积的测定Drug ActionADMEPharmacodynamics,PDPharmacokinetics,PKDrug-body interaction肝肝脏脏代代谢谢肾肾脏脏排排泄泄药物分布药物分布体内过程体内过程药物代谢动力学参数药物代谢动力学参数 吸吸 收收 分分 布布消消 除除快慢：快慢：Tmax程度：程度：AUC分布容积：分布容积：Vd半衰期：半衰期：t1/2如何获得药物代谢动力学参数？如何获得药物代谢动力学参数？0204060801001200246810Time(min)Plasma aspirin concentration(mg/L)CmaxTmaxivorallyArea under curve(AUC)ngh/mL绘制血药浓度绘制血药浓度-时间曲线时间曲线实验目的测定家兔静脉注射酚磺酞（测定家兔静脉注射酚磺酞（PSP PSP）后的）后的血药浓度；血药浓度；计算计算PSPPSP血浆半衰期及分布容积；血浆半衰期及分布容积；掌握药代动力学研究的方法。掌握药代动力学研究的方法。实验动物实验动物：家兔：家兔 实验器材实验器材：752型分光光度计、台式离心机、天平、型分光光度计、台式离心机、天平、离心管、手术器械、兔板、兔绳、纱布、注射器、试管、离心管、手术器械、兔板、兔绳、纱布、注射器、试管、微量吸液管、动脉夹、塑料管、丝线等。微量吸液管、动脉夹、塑料管、丝线等。实验药品实验药品：20%乌拉坦、乌拉坦、0.6 PSP（酚黄肽）溶液（酚黄肽）溶液、0.5肝素溶液、稀释液（肝素溶液、稀释液（0.9NaCl l29mllmol/L NaOH 1ml)动物与材料实验流程实验流程家兔的麻醉与给药家兔的麻醉与给药血浆样品的采集血浆样品的采集血药浓度的测定血药浓度的测定数据处理数据处理实验方法、家兔称重后麻醉：、家兔称重后麻醉：实验方法给药途径：给药途径：、家兔称重后麻醉：、家兔称重后麻醉：给药剂量：给药剂量：耳缘静脉注射耳缘静脉注射注意事项：注意事项：20%20%乌拉坦溶液乌拉坦溶液(5-7ml/kg)(5-7ml/kg)1 1）注射时，注意不能有大量气泡注入；）注射时，注意不能有大量气泡注入；2 2）留置事先用肝素化的头皮针（后面用于给药）留置事先用肝素化的头皮针（后面用于给药）实验方法 2、分离颈动脉进行插管、分离颈动脉进行插管颌内动脉颌内动脉颌外动脉颌外动脉颈内静脉颈内静脉颈内动脉颈内动脉颞浅动脉颞浅动脉面后动脉面后动脉耳廓后静脉耳廓后静脉耳廓后动脉耳廓后动脉近心端近心端远远心心端端动脉夹动脉夹近心端用动脉夹夹住，远心端结扎，并在动脉下面近心端用动脉夹夹住，远心端结扎，并在动脉下面预先穿一丝线备用。在靠近远心端结扎处剪一预先穿一丝线备用。在靠近远心端结扎处剪一“”字字形切口，插管、打结固定。形切口，插管、打结固定。取血时，不要将动脉取血时，不要将动脉夹抽离动脉夹抽离动脉实验方法 3、给药、给药u给药前：全身抗凝全身抗凝从耳缘静脉注入从耳缘静脉注入5 mg/kg5 mg/kg（lml/kglml/kg）肝素）肝素 样品管的标记与肝素化样品管的标记与肝素化用用0.1%0.1%肝素润洗，甩净肝素肝素润洗，甩净肝素 取空白取空白从颈动脉从颈动脉取正常血液取正常血液1ml1mlu给药：耳缘静脉注射耳缘静脉注射 0.6%PSP溶液溶液 剂量为剂量为6mgkg（1ml/kg）实验方法4、血浆样品的采集、血浆样品的采集u 采血时间：给药后给药后1 min、2.5 min、5.0 min、7.5 min、10 min、20 min、30 min分别从颈动脉取血分别从颈动脉取血1ml。u 离心：1500转转/分离心分离心10 min，取上清液，取上清液实验方法 5、血药浓度的测定（、血药浓度的测定（UV）u测定原理：酚红在碱性条件下显红色；吸光度酚红在碱性条件下显红色；吸光度-浓度符合浓度符合L-BL-B定律定律u测定方法：血浆血浆0.2 ml+稀释液稀释液3.0 ml混匀混匀560nm处比色处比色记记录吸光度值录吸光度值 代入标准曲线方程，求得血药浓度代入标准曲线方程，求得血药浓度实验方法6、数据处理、数据处理 药物静脉注射后，按一级动力学的规律消除；药物静脉注射后，按一级动力学的规律消除；直线方程为：用用Excel作图，横坐标作图，横坐标为时间，纵坐标为血药浓度为时间，纵坐标为血药浓度的对数值的对数值；实验方法6、数据处理、数据处理计算计算PSP血浆半衰期，其公式为：血浆半衰期，其公式为：T1/2=0.693/Ke 计算计算PSP表观分布容积，其公式为：表观分布容积，其公式为：Vd为为PSP用药剂为量用药剂为量；C0为为0min时的药物浓度，即：纵坐标截距时的药物浓度，即：纵坐标截距常用药代动力学软件常用药代动力学软件1.DAS软件（药物与统计）软件（药物与统计）2.WinNonlin（美国（美国Pharsight公司）公司）思考题思考题 1.1.什么是消除半衰期，有何实际意义？什么是消除半衰期，有何实际意义？2.2.什么是分布容积？什么是分布容积？3.3.药物代谢动力学研究常用哪些动物？常药物代谢动力学研究常用哪些动物？常用采血方式有哪些？用采血方式有哪些？注意事项实验结束后实验结束后耳缘静脉注射空气处死兔子耳缘静脉注射空气处死兔子各小组各小组-清洗和清点器械（清洗和清点器械（离心管离心管1616个、插个、插管、动脉夹一个、三通管、动脉夹一个、三通2 2个、个、手术器械等），手术器械等），擦试验台擦试验台清洗规则：清洗规则：无血渍、无兔毛、无垃圾无血渍、无兔毛、无垃圾留一小组打扫大实验室留一小组打扫大实验室凳子摆放、扫地、拖地凳子摆放、扫地、拖地实验报告实验报告每小组写一份实验报告（讨论、思考题部分，每个人分别总结，个人得分的依据）实验报告内容:实验题目、实验目的、实验药品和器材、实验过程、实验结果与讨论、思考题注意事项