GB_23200.57-2016 食品安全国家标准 食品中乙草胺残留量的检测方法.docx

ICS65.100025OB中华人民共和国国家标准GB23200.572016食品安全国家标准食品中乙草胺残留量的检测方法Nationalfoodsafetystandards-Determinationofacetochlorresidueinfoods201612-1 暖布2O17-06-18实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会中华人民共和国农业部发布国家食品药品监督管理总局-1-<-刖三本标准按照GB/T1.12009给出的规则起草。23222009相本标准代替SN/T2322-2009进出口食品中乙草胺残留量检测方法。与SN/T比，主要变化如下：一标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式；标准名称中“进出口食品”改为“食品”；标准范围中增加“其他食品可参照执行”。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：-SN/T23222009o食品安全国家标准食品中乙草胺残留量的检测方法1范围本标准规定了食品中乙草胺残留量的气相色谱测定、气相色谱一质谱法确证和制样方法。本标准适用于花生、大豆、玉米、小麦、洋葱、海菜、鸡肉、猪肉、腰果和松茸中乙草胺残留量的测定，其他食品可参照执行。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理试样中的乙草胺残留物用乙懵或乙酸乙酯提取，经凝胶渗透色谱仪(GPC)和(或)硅胶固相萃取柱(SPE)净化，用气相色谱法(GC)测定和气相色谱一质谱法(GC-MS)确证，外标法定量。4试剂和材料除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682中规定的一级水。4.1 试剂4.1.1正己烷(C6H4)。4.1.2乙酸乙酯(CJ的)。4.1.3环己烷(CH2)。4.1.4乙懵(CzH3N).4.15丙酮(CskO)。4.1.6无水硫酸钠(NazSOQ：经650灼烧4h,储于密封容器中备用。4.2 溶液配制4.2.1 乙酸乙酯一正己烷(3+97,体积比)：取30mL乙酸乙酯，加入970mL正己烷，摇匀备用。4.2.2 乙酸乙酯一正己烷（5+95,体积比）：取50mL乙酸乙酯，加入95OmL正己烷，摇匀备用。4.2.3 乙酸乙酯一环己烷（50+50,体积比）：取50OmL乙酸乙酯，加入50OmL正己烷，摇匀备用。4.3 标准品4.3.1 乙草胺标准品（acetochlor,C4比CINO?CAS号：34256-82-1）:纯度298%。4.4 标准溶液配制4.4.1 乙草胺标准溶液：称取适量的乙草胺标准品，用丙酮配成浓度为100UgZmL的标准储备液。根据需要将标准储备溶液用正己烷稀释成适当浓度的标准工作液。标准储备液和标准工作液在4条件下避光储存。有效期6个月。5仪器与设备5.1 气相色谱仪：配微池电子捕获检测器（U-ECD）。5.2 气相色谱一质谱仪：配电子轰击源（ED）。5.3 凝胶渗透色谱仪。5.4 旋转蒸发仪。5.5 离心机：5000rmin<>5.6 高速均质器。5.7 硅胶固相萃取柱：6mL100Omg,或相当者；使用前用IOmL正己烷淋洗。5.8 离心管：100mL,塑料和玻璃。5.9 滤膜：0.45Hm,有机相。5.10 分析天平：感量0.01g和aobig.6试样制备与保存6.1 取样部位样品取样被GB2763的规定执行6.2 球类、食用菌类6.2.1 取洋有代表性辛辣蔬菜样品500g,将其切成小块。装人洁净的容器内，并标明标记。-18°C以下保存。6.2.2 取有性蔬菜样品（洋葱等辛辣蔬菜除外）和松茸等有代表性食用菌样晶50将其用捣碎机加工成浆状昆匀，装人洁净的容器内，密闭并标明标记。18C以下保存。工6.3 海菜取有代表性海菜样品500g,切碎后，用捣碎机加工成浆状。混匀，装人清净的容器内，密闭并标明标记。-18C以下保有6.4 粮谷和坚果类取花生、玉米、小表、大、腰果等有代表性样品500g,用粉碎机粉碎，混匀，装入洁净的容器内，密闭并标明标记。4C以下保存。6.5 动物源类取鸡肉、猪肉等有代表性样品500g,用绞肉机绞碎，混匀，装人洁净的容器内，密闭并标明标记。-18以下保存。7测定步骤7.1 提取7.1.1 粮谷、坚果称取试样IOg(精确至O.1g)于100mL塑料离心管中，加入50mL乙懵，在匀浆器上匀浆2min。以4000rmin离心IOmin,将上清液倒入浓缩瓶中，浓缩至干，用IOmL乙酸乙酯一环己烷溶液溶解残渣，过膜，供凝胶渗透色谱(Gpe)净化。7.1.2 禽肉组织称取试样IOg(精确到0.1g)于IoOnIL塑料离心管中，加入5g无水硫酸钠，搅拌均匀，加入50mL乙懵，在匀浆器上匀浆2min°以4000r/min离心10Illin,将上清液用无水硫酸钠脱水后倒入浓缩瓶中，浓缩至干，用IOnlL乙酸乙酯一环己烷溶液溶解残渣，过膜，供凝胶渗透色谱(GPC)净化。7.1.3 洋慈称取试样5g（精确至Ojg）于100mL玻璃离心管中，在70OTV消解功率下微波消解40s<,恢复至室温，加入50mL乙酸乙酯，在匀浆器上匀浆2min。以4000rmin离心Ioinin,将上清液倒入浓缩瓶中，浓缩至干，用IniL正己烷溶解残渣，供固相萃取柱净化。7.1.4 蹦缄称取试样5g（精确至0.1g）于100nIL玻璃离心管中，加入50mL乙酸乙酯，在匀浆器上匀浆2min0以4000rmin离心IOmin,将上清液倒入浓缩瓶中，浓缩至干，用ImL正己烷溶解残渣，供固相萃取柱净化。7.2 或7.2.1 凝胶渗透色谱净化条件a）色谱柱：S-X320cm×2cm（内径），或相当者；b）流动相：环己烷一乙酸乙酯（1+1,体积比）；c）流速：5.OmL/min;d）进样量：5.OmL;e）淋洗体积：40mL;f）收集体积：30mL;g）清洗体积：10mL。7.2.2 凝胶渗透色谱净化将7.1中粮谷、坚果和禽肉组织的提取液过漉膜注入凝胶渗透色谱仪中，收集40mL70mL流出液,在40水浴上减压浓缩至干，用ImL正己烷溶解残渣，供固相萃取柱净化。7.2.3 硅胶固相萃取柱净化将7.1中洋葱、海菜、松茸提取液和7.2.2中净化液注入硅胶固相萃取柱中，再分2次，每次InIL正己烷润洗盛样液容器，注入硅胶柱中，依次用IOnlL正己烷、5mL乙酸乙酯一正己烷溶液和5mL乙酸乙酯一正己烷溶液淋洗，再用15mL乙酸乙酯一正己烷溶液洗脱，收集洗脱液于40C水浴减压浓缩至干，用正已烷定容至5mL,供气相色谱测定和气相色谱一质谱确证。7.3 濯定7.3.1 气相色谱参考条件a）色谱柱：DB-5石英毛细管柱，30m×0.32mm（内径），膜厚0.25m,或相当者；15'Cminb）色谱柱温度：60oC（lmin）-260°C（5min）,300C（后运行15min）;c）进样口温度：250C;d）检测器温度：325C;e）载气：氮气，纯度299.995%,1.8mLmin;f）进样量：IuL;g）进样方式：无分流进样，0.75Inin后开阀。7.3.2 气相色谱一质谱参考条件a）色谱柱：DB-5MS石英毛细管柱，30mX0.25mm（内径），膜厚0.25Un1,或相当者;b）色谱柱温度：60（Imin）.15C/min260oC（5min）,300C（后运行15min）;c）进样口温度：250cC;d）色谱一质谱接口温度：280C;e）载气：氮气，纯度299.995%,LomLmin;f）进样量：IuL;g）进样方式：无分流进样，O.75min后开阀；h）电离方式：EI;i）电离能量：70eV;j）测定方式：选择离子监测方式（SIM）;k）监测离子（mz）:定量162,定性174、234、269;1）溶剂延迟：3Inino7.3.3 气相色谱测定根据样液中乙草胺含量情况，选定浓度相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中乙草胺响应值均应在仪器检测线性范围内。标准工作溶液和样液等体积穿插进样测定。在上述色谱条件下，乙草胺的保留时间约为12.3min标准品的色谱图参见图A.1。7.3.4 气相色谱一质谱确证乙草胺标准溶液及构按7.3规定的条件进行测定，如果种液与榕液相同的保留时间有峰出现，则对其进行质谱确证。确证分析被测物SlM色谱峰保留时间与标品一致，并且在扣除背景后的样品谱图中选择的离子均现；选择离子m/162,174234、269（度比为100:54:24:8）与标准样离子的相对丰度个致，相似度在允许偏差之内（见表个），则可判定样品中存在乙草胺。乙草胺标总离子流色谱图、选择离子质谱图和全打描质谱图参见图A.2A.3和图A.4。表1GC-MS确证相对离子丰度的最大允许偏差单位为百分率相对丰度（基峰）>502050（含1020（含）10允许的相对偏差+20±25±30±507.4空白试验除不加试外，均按7.17.3的规定执行。8结果计算和表述用色谱数据处理机或按式计算试样中乙草胺的含量，计算结果需将空白值扣除。X=iA×cXV（1AsXm式中：X-试样中乙草胺的含量，单位为毫克每千克（mgkg）;C标准工作液中乙草胺的浓度，位为雌每毫升(gL);A样品溶液中乙草胺的峰面积；As标准工作溶液中乙草胺的峰面积V一样液最终定容体积，单位为亳升(mL);m最终样液所代表的试样量，单位为克(g)。计算结果需扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留2位有效数字。9精密度9. 1在重复性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值(百分率)，应符合附录B的要求。10. 2在再现性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值(百分率)，应符合附录C的要求。11. 定限和回收率11.1 定限本方法的定量限均为0.01mgkgo11.2 回收率气相色谱法检测样品的添加浓度及回收率数据参见表D.1,气相色谱-质谱法检测样品的添加浓度及回收率数据参见表【）.2。A.1乙草胺标准品气相色谱图附录A（资料性附录）乙草胺标准品色谱图和质谱图见图A.1。图A.1乙草胺标准品气相色谱图A.2乙草胺标准品总离子流色谱图(TIC)见图A.2。响应值19018O17016015000乙草胺I4O130120Il0IO(XX)9(MX)80007060504(XX)3(X)020I(X)O4.6.8.0010.I2.14.16.0018.00t.min图A2乙草胺标准品总离子流色谱图(TIC)A.3乙草胺标准品选择离子IC质谱图见图A.3.响应值5.00016245004