尿素测定标准操作规程.docx

尿素测定标准操作规程1.检验原理：(酶偶联检测法)尿素经胭酶催化水解生成氨与二氧化碳，在谷氨酸脱氢酶催化下，氨与a-酮戊二酸、还原型辅酶I(NADH)作用生成谷氨酸与氧化型辅酶I(NADD,还原型辅酶I在340nm波长处有吸收峰，而氧化型辅酶I几乎无吸收峰，还原型辅酶I在340nm吸光度的下降速率与样品中尿素含量成正比。尿素+2H2Ow>2NHCO：A酮戊二酸+NH；+NADH+H'缺哪渺.>l谷氨酸+NAD+H2O2.试剂主要组成成分组成成分浓度Rl三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH6.15)150mmolL二磷酸腺甘(ADP)0.6mmolL腺酶8000U/L谷氨酸脱氢酶700U/LR2三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH6.15)150mmolLa-酮戊二酸15mmolL还原型辅酶I0.8mmolLSTD尿素(水基质)7.14mmolL3.样本要求：新鲜无溶血血清。在2225°C保存8小时，28保48小时，-20保存7天，样本不可反复冻融！样本中抗坏血酸含量W0.3g/L、胆红素含量0.4gL血红蛋白含量W5.0gL、脂血含量W5.OgL对检测结果基本无影响。4.检验方法；仪器法(详见DF-603/Dl-600标准操作规程)5.参考范围：样本参考范围(mmolL)血清2.9-8.26.检验结果的解释：6.1 样本含量超出线性范围时，建议用0.9%(WV)的氯化钠溶液稀释样本,最大稀释不超过10倍。6. 2.单位换算：mgdl=三olL×6.027.检验方法的局限性7.1 结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。7. 2若试剂浑浊，或以水空白在340nm处吸光度小于1.000时不能使用。7. 3检验结果仅供参考，不作为临床诊断的唯一依据。8.试剂性能指标8.1 试剂外观：无色透明液体，无悬浮物及沉淀。8.2装量：不低于标识值。8. 3试剂空白8.3. 1试剂空白吸光度：在34Onnl处，光径ICnl时，空白吸光度A2L0008 .3.2试剂空白吸光度变化率:在340nm处,光径Icm时，Amin0.004.9 .4线性区间:试剂的线性区间为0.9-35.7mmolL,在此线性区间内:a）线性相关系数r应不小于0.9900；b）0.9-4.0mmolL区间内，线性绝对偏差不超过±0.4mmolL;4.0-35.7Umol/L区间内，线性相对偏差不超过±10%。8. 5准确度：相对偏差应不大于±15%。8. 6分析灵敏度：在340nm处，光径Icm时，测量InimO1/L的尿素时，吸光度变化4AmmolL20.0018. 7精密度8.7. 1批内精密度：CV5%8. 7.2批间精密度:R10%9. 8校准品9.8. 1外观：无色透明液体。8.8.2净含量：不少于标识值8.8.3准确度：标准生化分析仪和试剂后，测定校准品，相对偏差应不大于10%o8.8.4均一性：瓶间均一性:CV5%9.临床意义：尿素测定是肾功能最广泛应用的试验，本试验常与肌酢同时测定，用于肾前性高尿素血症（心脏代谢失常、脱水、蛋白分解代谢增加）、肾性高尿素血症（肾小球性肾炎、慢性肾炎、多囊肾、肾硬变、肾小管坏死）和肾后性高尿素血症（尿路梗阻）的鉴别诊断。尿素是蛋白质和氨基酸代谢的终产物。在蛋白代谢过程中，蛋白质被分解成氨基酸，然后脱氨基，生成的氨在肝脏中合成尿素。这是人体排泄多余氮的最重要的代谢途径。