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    丙肝抗体检测(HCV-Ab).docx

    • 资源ID:422357       资源大小:17.96KB        全文页数:3页
    • 资源格式: DOCX        下载积分:3金币
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    丙肝抗体检测(HCV-Ab).docx

    丙肝抗体检测(HCV-Ab)1.方法:胶体金法2 .原理:本品采用胶体金免疫层析专业技术,在玻璃纤维素膜上预包被金标鼠抗人IgG抗体,在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包被丙肝混合抗原和人IgG抗体。检测阳性标本时,血清样本中HCV-Ab与胶体金标记鼠抗体IgG抗体结合形成复合物,由于层析作用复合物沿纸条向前移动,经过检测线时与预包被的抗原结合形成“Au-anti-IgGAb-HCVAb-HCVAg"夹心物而凝聚显色,游离金标鼠抗人IgG抗体则在对照线处与人IgG抗体结合而富集显色。阴性标本则仅在对照线处显色,15分钟内观察结果即可。3 .样本要求3.1 采集静脉血样本必须在无菌条件下操作,并避免溶血。3. 2如果血清和血浆样品在收集后七天内检测,样品须放在0-4C保存;大于七天必须-20以下冷冻保存,可保存3年,反复冻融次数不超过三次。4. 3临床常用抗凝剂(EDTA,肝素、枸椽酸钠)等血浆样本不影响检测结果。5. 4溶血、黏稠及高脂标本不适本试剂。含特殊物质的标本可能会导致结果不稳定,在检测前须清除。6. 5在标本中加O.l%NaN3不影响实验结果4.检测方法4.1 将待测标本从储存条件下取出,平衡至室温并编号。4. 2将胶体金条从包装盒中取出,打开铝箔包装袋,平置于台面上。4. 3用塑料管加一滴(IOul)血清或血浆样本,加到试纸条指示箭头下端的加样处。7. 4随即加2滴样本稀释液(约100uD4.5加样后,阳性标本可在115分钟内检出,建议15分钟后再最终观察并记录实验结果。8. 结果判断阳性:试纸条在检测线和对照线位置出现两条紫红色条带。阴性:试纸条只在对照线位置出现一条紫红色条带失效:对照线未出现紫红色条带,表明不正确的操作过程或试剂盒已变质损坏。在此情况下,应再次仔细阅读说明书,并用新的试剂重新测试。如果问题仍然存在,应立即停止使用此批号产品,并与当地供应商联系。注意:检测线内的紫红色条带可呈现颜色深浅的现象。但是,在规定的观察时间内,不论该色带颜色深浅,即使只有非常弱的色带也应判定为阳性结果。9. 测方法的局限性本法测定阳性结果的样本,都须用其他方法,如酶联免疫法(ELISA)进一步确认。10. 性能指标7. 1用国家参考品或经标滑的企业参考品测定,产品性能应符合以下要求。阴性参考品符合率:20份的阴性参考品检测符合率(-/-)19/20阳性参考品符合率:20份的阳性参考品检测符合率(+/+)219/20最低检出限:Ll1:8阳性,1:16可阳性或阴性;L21:64阳性,1:128可阳性或阴性。重复性:平行测定10次,结果均为阳性,且显色度均一。稳定性:试剂盒37C20天,阴性参考品符合率、最低检出限和重复性均应符合要求。7.2.乙肝、甲肝、庚肝、戊肝、人类免疫缺陷病毒(HIV)、类风湿因子(RF).红斑狼疮等各种类型的标本不会对测试结果产生干扰。7.3、胆红素(342.0Hmol/L)、胆固醇(20.7InInol/L)、血红蛋白(5.0gL)甘油三酯(28.2mmolL)不影响检测结果。8.注意事项8.1本试剂盒仅用于体外诊断试验。仅用于人血清或血浆,其他体液和样品可能得不到准确的结果。8.2实验环境应保持一定湿度,避风。避免在过高温度下进行实验。8.3试剂可在室温下保存,谨防受潮。低温下保存的试剂应平衡至室温方可使用。8.4对于那些含有感染源和怀疑含有感染源的物质应有合适的生物安全保证程序,下列为有关注意事项;1)戴手套处理样品和试剂2)不要用嘴吸样3)不可在处理这些物品时吸烟、进食、喝饮料、美容和处理隐形眼镜4)用消毒剂对溅出的样品或试剂进行消毒5)按当地的有关条例来消毒和处理所有标本、试剂和潜在的污染物6)试剂盒各组分在正当处理和保存的情况下直至有效期都保持稳定,不能使用过效期的试剂盒8.5检测线颜色的深浅程度与样品中抗体的滴度没有一定的必然联系。8.6任何一种试剂都不能绝对保证样品中没有低浓度的抗体存在,所以阴性结果任何时候不能排除含有HCV暴露和感染的可能。8.7试验中接触到的临床样本、实验室废弃物、一次性使用物品等材料应当作为潜在传染物进行处理,并采用相应的预防措施。

    注意事项

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