唐棣组培快繁技术规程.docx

唐棣组培快繁技术规程1范围本文件规定了唐棣（AmelancIuersimca）组培快繁的培养基配制、外植体制备、诱导培养、继代增殖培养、生根培养、炼苗、壮苗培育和生产档案。本文件适用于唐棣组培快繁。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB6000主要造林树种苗木质量分级GB/T6001育苗技术规程3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4培养基配制4.1 培养基配方a）初代培养基：MS+1.0mg/LTBA+1.5mg/L6-BA÷30g/L蔗糖+7gLX脂,PH值5.65.8:b）继代芽分化增殖培养基：MS+1.0mg/LIBA+2.5mgL6-BA+2.0mg/LGA11+30g/L蔗糖+7.0g/LX脂粉，PH值5.65.8;c）生根培养基：MS+O.1mg/LNAA+O.2gL活性炭+30g/L蔗糖+7gLX脂，PH值5.65.8。4.2 培养基灭菌培养基配制后10h内完成灭菌，采用高压蒸汽灭菌，在压力0.105MPa、温度121条件下灭菌20Inin30Inino4.3 培养基保存培养基应保存于洁净环境中，注意避光和防尘。灭菌后的培养基在常温条件可保存7d,2C4°C条件下可保存14do5外植体制备5.1 外植体选择选择生长发育良好、无病虫害、无机械损伤的植株作为采样母株。采样时间6月中旬7月中旬的晴天上午。剪取带腋芽的茎段作为外植体。5.2 外植体消毒将外植体流水冲2h3ho然后在超净工作台上用70%酒精浸泡消毒8S15So倾去酒精后，用无菌水冲洗外植体3次4次。用0.1%HgCI2浸泡5Inin8min。无菌水冲洗4次6次。用无菌滤纸吸干外植体表面的水分。6诱导培养将消毒后的外植体剪成1.5Cnl2cm的茎段，每段带有1个2个腋芽，将剪好的外植体接茎段,芽尖朝上插入诱导培养基中，培养瓶上注明接种物名称和日期。然后将培养瓶摆放在培养架上进行光照培养20d25d,光照周期是10hd12hd,光照强度为1500LUX2000LUX。培养温度25C±3°C,相对空气湿度控制在70%80机7继代增殖培养分化的芽接入继代增殖培养基中，光照培养30d35d,光照周期是10h/d12hd,光照强度为3000Lux-5000Lux。培养温度25C±3°C,相对空气湿度控制在70%80%。待形成芽丛，分割新长出的不定芽，可按需求重复继代。8生根培养选取培养瓶中长度1.5cm3CIn生长健壮的芽接种至生根培养基中，继续光照培养100d-120d,光照周期是10h/d12h/d,光照强度为3000Lux-5000Lxo培养温度25°C±3C,相对空气湿度控制在70%80机9炼苗9.1炼苗标准组培幼苗高度3Cm4Cnb基部长出3条以上、长2Cm3Cin的新根时，进行炼苗处理。9.2 封瓶炼苗将装组培苗的培养瓶从培养架上轻轻取下，迅速转移到日光温室中。自然散射光下炼苗，温度控制在2025,光照强度为1500LUX3000LUX,每天中午在培养瓶周围喷洒雾水，以保湿降温。封口炼苗3d7d.9.3 开瓶炼苗将培养瓶的瓶盖轻轻拧开，慢慢透气，1d后揭去瓶盖，开口炼苗2d4d。待组培苗大部分幼苗生长有活力、粗壮、挺直，有层次感、色泽正常，叶片翠绿，苗高4Cnl8cm、叶片4片8片、根系长3CnI7Cnb即可适时移栽。10壮苗培育10.1 基质配制装有黑壤土、草碳土和细河沙（混合比例为2：1：1,混合前分别过细筛）混合基质的育苗盘中。基质宜疏松、透水、通气，在使用前可用0.5g/L的多菌灵溶液浸透。育苗盘采用35cmX50Cm常规育苗塑料盘，育苗盘四壁高度不能低于7cm,育苗基质放入育苗容器并浇透水后，厚度应不小于5cm。10.2 育苗管理用手指或镜子轻轻取出组培苗，用清水洗去苗基部的培养基，整齐地分级移栽至移栽至装满基质的育苗盘中。移栽以傍晚进行为宜。移栽初期要保持较高的空气湿度，并根据基质湿度和空气湿度给予植株适度的浇水管理，原则是保持基质见干见湿，育苗设施内温度保持在18°C25°C,光照充足。其他管理按照GB/T6001育苗技术规程进行。11生产档案应建立唐棣组培苗生产档案，内容包括：培养基配制、诱导培养、继代增殖培养、生根培养、炼苗、壮苗培育情况等。