呼吸道感染性病原体的多重核酸检测.docx

呼吸道感染性病原体的多重核酸检测呼吸道感染按照感染位置分为上/下呼吸道感染，引起的病原体包括细菌、病毒、支原体、衣原体、军团菌和真菌等。由于一种病原体可引起多种临床症状，同一临床症状可有多种病原体引起，使得病原体检测面临挑战。另外，90%以上急性呼吸道感染是由病毒引起的，若能及时明确感染病原，可避免抗生素的滥用并促进临床及时开展抗病毒治疗。现有的检测方法包括病毒培养、免疫性检测和分子生物学检测等方法，各有其优缺点，其中分子生物学技术灵敏度和特异性最好，但传统核酸检测技术只能只对单一病原体,效率较低。多重PCR技术将扩增和检测效率都提高了1个数量级。通过单管内同时加入多达40个引物进行逆转录和基因扩增，随后根据片段长度判断病原体种类。经过核酸抽提、扩增、电泳、判断4个步骤完成检测流程，最终将呼吸道常见的13种病原体清晰明确地表示在软件图谱上。需要注意的是，核酸检测中，标本质量对于实验结果的影响重大，推荐使用可代表下气道的抽吸痰液送检，若无痰液仅能送检咽拭子，则应注意采集手法。鉴于多重PCR技术的优秀表现，该技术已被写入各类指南及专家共识中，本科室使用该技术不但为临床提供了辅助诊断工具，还积累了部分科研成果分享给读者。第一，各类病原体具有不同的季节流行趋势，小年龄儿童仍是各类病毒感染的主要受累人群。第二，配对研究表明,肺炎支原体抗体结果与核酸结果存在与年龄相关的不一致现象，年龄越小，不一致率越高。第三，肺炎支原体的合并感染占比高达37%,最易合并的病原体为鼻病毒。综上，临床常见呼吸道感染病原体以病毒为主，多重核酸检测已获多种专业机构的推荐，可为临床提供快速、准确的病原学诊断依据，并具有科研价值。