重庆医科大学药学院教案用纸（首页）.docx

教案完成时间第次课授课时间教室学科年级专业、层次教师职称授课方式(大班)大班学时3课题(章、节)双波长分光光度法同时测定药物中维生素C和维生素E基本教材或主要参考书医用化学实验实验目的1、掌握紫外一可见分光光度计的使用方法。2、学习在紫外光谱区同时测定双组分体系一一维生素C和维生素E的方法。教学重点、难点：1、紫外一可见分光光度计的使用方法。2、利用双波长法同时测定双组分体系一一维生素C和维生素E的方法。讲授提纲及学时分配：8分钟：实验原理。8分钟：实验步骤。5分钟：操作要点和注意事项。2分钟：思考题3分钟：实验报告要求教具及教学设备要求：UNICO-2000紫外一可见分光光度计及相应的配套软件，石英比色皿(ICm),容量瓶(25ml),容量瓶(IOm1),吸量管(IOmI)移液管(Im1)。维生素C储备液(3.00×104molLT)维生素E储备液(4.52×10"molLT)基本内容辅助手段和时间分配一、实验原理维生素C（抗坏血酸）维生素E（生育酚）起抗氧剂作用，即它们在一定时间内能防止油脂变酸。因为它们在抗氧剂性能方面是“协同的”，所以两者结合在一起比单独使用的效果更佳。因此，它们作为一种有用的组合试剂用于各种食品中。维生素C和维生素E在紫外光区具有不同的最大吸收波长，维生素2分钟2分钟C是水溶性的，维生素E是脂溶性的，但它们都能溶于无水乙醇，可在同一溶液中利用双组分测定原理同时测定。朗伯比耳定律应用于双组分体系，可得到下列联立方程式：总jCC1eEA入、=k%c+匕产4分钟a总7CCl7EEAa2=kz2c+k2c上下两个方程式分别为波长h波长2下总吸光度A4、Aj与维生素C浓度（CC）及维生E浓度（CE）的关系式。解上述方程即可求出CC和C*o本实验的关键是准确测绘出维生素C和维生素E的吸收光谱，确定最大吸收波长l和2°二、实验步骤（一）配置标准溶液1、分别准确取维生素C储备液4.00ml、6.00mk8.00ml、10.0OmI于4个25ml容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。2、分别准确取维生素E储备液4.00ml、6.00ml、8.00ml、10.0Oml于4个25ml容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。1分钟（二）扫描吸收光谱以无水乙静为参比，取6.00ml的标准溶液，在20030Onm范围扫描出维生素C和维生素E的吸收光谱，并确定l和2,打印谱图。2分钟基本内容辅助手段和时间分配（三）建立工作曲线2分钟以无水乙醇为参比，在波长l和2处分别测定步骤1配制的8个标准溶液的吸光度。运用UNICO-2000数据处理软件系统，分别建立并打印4条工作曲线。（四）药物中维生素C和维生素E的测定准确称取001500.0200g的含有维生素C（抗坏血酸）和维生素E2分钟（。一生育酚）的药物，溶于无水乙醇中，并用无水乙醇定溶于25ml容量瓶中。用Iml移液管吸取上述溶液于IOml容量瓶，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。在波长l和入2处分别测定其吸光度。（五）数据处理1 .打印维生素C和维生素E的吸收光谱图，确定入1和2.2 .分别打印维生素C和维生素E在l和2时的4条工作曲线，求出4条曲线的斜率，k%k2kk293 .计算药物未知液中的维生素C和维生素E的浓度。1分钟三、操作要点和注意事项1、正确使用参比溶液校正仪器。2、每变换一次波长就需用参比溶液校正仪器。3、维生素C（抗坏血酸）会慢慢地氧化成脱氧抗坏血酸，所以必须每次实验时配制新鲜溶液。4、使用紫外分光光度计前必须认真阅读仪器操作规程，以免使用不当造成仪器性能下降，甚至损坏仪器。四、思考题1.从维生素C和维生素E的结构式解释一个是“水溶性”，一个是“脂2分钟溶性”的原因。2.使用本方法测定维生素C和维生素E是否灵敏？解释其原因。五、实验报告要求1 .格式正确，内容完整。2 .数据记录清晰，数据处理正确。3 .实验报告不得抄袭和伪造。3分钟