医学微生物学实验一课件.ppt

医学微生物学医学微生物学实验课件实验课件实验内容实验内容一、显微镜的使用操作及注意事项一、显微镜的使用操作及注意事项二、细菌的形态和特殊结构观察：二、细菌的形态和特殊结构观察： 1.自阅片：破伤风杆菌（示芽胞）、变形杆菌（示鞭毛）自阅片：破伤风杆菌（示芽胞）、变形杆菌（示鞭毛） 2. 示教片：肺炎链球菌（示荚膜）示教片：肺炎链球菌（示荚膜）三、革兰染色法（自做）三、革兰染色法（自做） 实验室规则实验室规则微生物学实验要求微生物学实验要求 1、微生物无处不在：、微生物无处不在：故要树立有菌观念，实验过程要无菌操故要树立有菌观念，实验过程要无菌操作作; 2、实验材料为病原微生物，具有感染性、实验材料为病原微生物，具有感染性 1）穿好白大衣，除必要的书籍、记录本及文具外，其他）穿好白大衣，除必要的书籍、记录本及文具外，其他 个人用品不得带入实验室；个人用品不得带入实验室； 2）实验室禁止饮食，未经许可严禁将实验材料带出实验室）实验室禁止饮食，未经许可严禁将实验材料带出实验室3、按照实验要求，认真积极的完成实验，有些实验需第二、按照实验要求，认真积极的完成实验，有些实验需第二天观察结果，要求同学们亲自观察，并详细记录结果，完天观察结果，要求同学们亲自观察，并详细记录结果，完成实验报告；成实验报告；4、爱护实验器材，实验用过的器材放置指定位置，实验室、爱护实验器材，实验用过的器材放置指定位置，实验室仪器不得乱摸乱碰；实验自阅玻片标本损坏仪器不得乱摸乱碰；实验自阅玻片标本损坏10元元/张；张；5、实验完毕后，整理实验台，值日生负责室内卫生，并负、实验完毕后，整理实验台，值日生负责室内卫生，并负责关门、关窗、关水、关电。责关门、关窗、关水、关电。一、显微镜的使用操作及注意事项一、显微镜的使用操作及注意事项二、二、显显微微镜镜的的使使用用 （一）观察前准备（一）观察前准备1. 2. 使用使用时，为使通光量最大，可采用：时，为使通光量最大，可采用： 1）开到最大；开到最大； 2）上升到最高；上升到最高； 3）低倍（）低倍（10）物镜下，转动）物镜下，转动，使视野的，使视野的光照达到最明亮光照达到最明亮 均匀。均匀。 （二）（二）低倍镜低倍镜观察观察 旋钮调节：物像出现旋钮调节：物像出现旋钮调节：物像清晰旋钮调节：物像清晰为什么为什么？（三）（三）高倍镜高倍镜观察观察在低倍镜转换高倍镜（在低倍镜转换高倍镜（40 x ）适当调节适当调节细细螺旋即可看到物像螺旋即可看到物像 ，否则极易压碎标本甚，否则极易压碎标本甚至损坏物镜。至损坏物镜。（四）（四）油镜油镜观察观察 1.滴油（滴油（） 2.转换为油镜头，使其浸入香柏油转换为油镜头，使其浸入香柏油 3.调节调节即可找到物像即可找到物像 l 油镜头须浸入油中油镜头须浸入油中l l 光圈需开至最大光圈需开至最大l 聚光器须上升至最高聚光器须上升至最高4.玻片处理玻片处理5.镜头擦拭：限取镜头擦拭：限取3张擦镜纸张擦镜纸 -如香柏油不慎玷污如香柏油不慎玷污应立即应立即拭去拭去 （-擦拭时沿一个方向，擦拭时沿一个方向，6.还原各部分还原各部分7.二、细菌的形态和特殊结构观察二、细菌的形态和特殊结构观察（一）（一） 细菌的基本形态细菌的基本形态： (葡萄状排列葡萄状排列) 链球菌链球菌 (链状排列链状排列) 脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌(成双排列成双排列)：、枯草杆菌等、枯草杆菌等： 霍乱弧菌等霍乱弧菌等 1. 荚荚 膜膜 荚膜与微荚膜概念荚膜与微荚膜概念 化学成分化学成分 变异变异 医学意义医学意义 （二）细菌的特殊结构（二）细菌的特殊结构取材：小鼠腹腔渗出液取材：小鼠腹腔渗出液染色法：染色法：Hiss染色染色放大倍数：放大倍数：10X100荚膜菌体2. 鞭鞭 毛（毛（Flagllum） 概念概念 数目、位置和排列可不同数目、位置和排列可不同 鞭毛是细菌的运动器官鞭毛是细菌的运动器官 医学意义：医学意义：鞭毛菌体取材：纯培养物取材：纯培养物染色法：鞭毛染色染色法：鞭毛染色放大倍数：放大倍数：10X1003. 芽芽 胞胞 概念概念 形状、直径、位置随菌种而不同形状、直径、位置随菌种而不同 形成条件形成条件 非细菌的繁殖体非细菌的繁殖体 抵抗力强抵抗力强 医学意义：医学意义：芽胞菌体取材：纯培养物取材：纯培养物染色法：革兰染色染色法：革兰染色放大倍数：放大倍数：10X1004. 菌菌 毛毛 概念概念 在光镜下看不见，使用电镜才能观察到在光镜下看不见，使用电镜才能观察到 分类：普通菌毛和性菌毛分类：普通菌毛和性菌毛 医学意义医学意义三、革兰氏染色法三、革兰氏染色法 常用染色方法常用染色方法 单染法单染法： 一种染料使细菌着色，如美蓝和复红染色；一种染料使细菌着色，如美蓝和复红染色； 复染法复染法： 两种或两种以上染料染色，有助于鉴别细菌，两种或两种以上染料染色，有助于鉴别细菌，如革兰染色法和抗酸染色法。如革兰染色法和抗酸染色法。结晶紫结晶紫卢戈碘液液卢戈碘液液酒精酒精复红复红G-菌：菌：类脂质类脂质肽聚糖肽聚糖G+菌：菌：肽聚糖肽聚糖交联度大交联度大类脂质类脂质：两类细菌的两类细菌的成分和结构差异成分和结构差异【原理原理】【材料材料】1. 葡萄球菌、大肠杆菌混合菌液。葡萄球菌、大肠杆菌混合菌液。2. 革兰染色液。革兰染色液。 涂片：涂片： 干干 燥燥 固固 定定 染染 色色【步骤步骤】 ：结晶紫染液染结晶紫染液染 水洗，甩干水洗，甩干 ：卢戈氏碘液染卢戈氏碘液染 水洗，甩干水洗，甩干 ： 酒精脱色约酒精脱色约 水洗，甩干水洗，甩干 复染： 复红染液染复红染液染 水洗，甩干水洗，甩干 油镜观检油镜观检染染色色革兰阳性球菌革兰阳性球菌革兰阴性杆菌革兰阴性杆菌取材：培养混合菌液取材：培养混合菌液放大倍数：放大倍数：100X10革兰染色结果革兰染色结果【结果结果】作作 业业1、细菌特殊结构绘图、细菌特殊结构绘图2、革兰染色法的完全实验报告（实验名称、目的、革兰染色法的完全实验报告（实验名称、目的、材料、步骤、结果、分析、结论）材料、步骤、结果、分析、结论）