分解纤维素的微生物.ppt

土壤中能水解纤维素的微生物土壤中能水解纤维素的微生物1 1、纤维素在生物圈的分布状况？、纤维素在生物圈的分布状况？2 2、纤维素酶的组成及作用？、纤维素酶的组成及作用？一种复合酶，包括一种复合酶，包括C C1 1酶、酶、C CX X酶酶和和葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶回顾：纤维素和纤维素酶回顾：纤维素和纤维素酶纤维素纤维素 纤维二糖纤维二糖 葡萄糖葡萄糖C C1 1酶酶、C CX X酶酶葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶能够溶解纤维素的粘细菌能够溶解纤维素的粘细菌1 1能够溶解纤维素的粘细菌能够溶解纤维素的粘细菌2 2选择培养选择培养1 1、配方是液体培养基还是固体、配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？培养基？为什么？2 2、此培养基对微生物是否有选择、此培养基对微生物是否有选择作用？如果有，是如何选择的？作用？如果有，是如何选择的？ 3 3、你能否设计一个对照实验，说明、你能否设计一个对照实验，说明 选择培养基的作用选择培养基的作用？用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照选择培养基配方：选择培养基配方：纤维素粉纤维素粉 5g5gNaNO3 1gNaNO3 1gNa2HPO4Na2HPO47H2O 1.2g7H2O 1.2gKH2PO4 0.9gKH2PO4 0.9gMgSO4MgSO47H2O 0.5g7H2O 0.5gKCl KCl 0.5g酵母膏酵母膏 0.5g水解酪素水解酪素 0.5g 将上述物质水解后，用将上述物质水解后，用蒸馏水定容到蒸馏水定容到1000ml1000ml 有。碳源是纤维素，所以能分有。碳源是纤维素，所以能分解纤维素的微生物可以大量繁殖。解纤维素的微生物可以大量繁殖。以纤维素作为唯一碳源以纤维素作为唯一碳源利用纤维素刚果红培养基筛选菌种的原理是：利用纤维素刚果红培养基筛选菌种的原理是：1 1、刚果红可以跟大分子多糖牢固结合。、刚果红可以跟大分子多糖牢固结合。2 2、纤维素是大分子多糖，跟刚果红牢固结合。、纤维素是大分子多糖，跟刚果红牢固结合。3 3、纤维素酶降解平板中的纤维素成小分子糖，刚果红无法、纤维素酶降解平板中的纤维素成小分子糖，刚果红无法与小分子糖结合，就被洗脱下来，呈现透明圈。与小分子糖结合，就被洗脱下来，呈现透明圈。刚果红染色法刚果红染色法方法一：方法一：先培养微生物，再加入刚果红进先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应行颜色反应方法二：方法二：在倒平板时就加入刚果红在倒平板时就加入刚果红思考：思考：这两种方法各有哪些优点与不足这两种方法各有哪些优点与不足 方法一方法一 缺点是操作烦琐，加入刚果红溶液会使菌落之间缺点是操作烦琐，加入刚果红溶液会使菌落之间发发 生混杂；优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解生混杂；优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用菌的作用 方法二方法二 优点是操作简便，不存在菌落混杂问题优点是操作简便，不存在菌落混杂问题缺点一是由于培养基中还含有淀粉类物质，可以使能产生淀粉缺点一是由于培养基中还含有淀粉类物质，可以使能产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应；缺点二有些微生物具有降解色素酶的微生物出现假阳性反应；缺点二有些微生物具有降解色素的能力，它们在长时间培养过程中会降解刚果红，形成明显的的能力，它们在长时间培养过程中会降解刚果红，形成明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区分透明圈，与纤维素分解菌不易区分土壤中纤维素分解菌的分离土壤中纤维素分解菌的分离土壤取样土壤取样选择培养选择培养梯度稀释梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上素分解菌的培养基上挑选产生透明挑选产生透明圈的菌落圈的菌落加入青霉素的培养基：加入青霉素的培养基：加入高浓度食盐的培养基：加入高浓度食盐的培养基：不含有机碳源的培养基不含有机碳源的培养基自养型（硝化细菌）自养型（硝化细菌）酵母菌、霉菌酵母菌、霉菌金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌在微生物学中，将在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为的培养基称为选择培养基。选择培养基。分解尿素的细菌分解尿素的细菌以尿素作为唯一氮源的培养基：以尿素作为唯一氮源的培养基：伊红伊红美蓝培养基美蓝培养基是鉴别培养基，可以是鉴别培养基，可以用来检测自来水中的大肠杆菌是否超标、用来检测自来水中的大肠杆菌是否超标、例如：鉴别大肠杆菌培养基例如：鉴别大肠杆菌培养基菌落呈黑色菌落呈黑色纯净菌种的保藏纯净菌种的保藏1、斜面保藏、斜面保藏 （临时保存）（临时保存）2、甘油保藏、甘油保藏 （长期保存）（长期保存）