苍术叶斑病病原学及其防治基础研究.docx
硕士考佐卷攵苍术叶斑病病原学及其防治基础研究独创性声明本人声明本论文是我个人在导师指导下完成的研究工作及取得的成果。尽我所知，除了文中特别标注和致谢提到之处外，本论文不包含其他人的研究成果和已经发表的文字表述，也不包含本人或他人为获得沈阳农业大学或其它教育机构的学位、证书等而使用过的材料。本论文对与我一同工作的同志为本研究所做的页献均已做了说明并表达了诚挚的谢意。研究生签名:时间：年月日导师签名:时间：年月曰关于论文知识产权和使用授权的说明本人完全了解沈阳农业大学有关保留、使用本校毕业生学位论文的规定，即本论文知识产权单位为沈阳农业大学；沈阳农业大学有权保留本论文的纸质文本和电磁介质文木，有权允许他人查阅和借阅本论文各种文本，有权采用影印、缩印或扫描等方式复制、保存、汇编本论文，有权以不同方式在媒体上发表、传播本学位论文的内容。（保密的学位论文在解密后遵守此柳议）研究生签名:时间：年月日导师签名:时间:年月曰目录摘要1Abstract3第一章药用植物球壳抱目病害研究进展61.1 球壳抱目其曲的种类及形态特征61.2 球亮抱目真菌鉴定技术71.3 球克抱目真菌引致药用植物病害种类及危害91.4 球壳抱目真菌引致药用植物病害发生规律121.5 球壳胞目真菌引致药用植物病需防治措施13第二章苍术叶斑病发生危害及病原鉴定152.1 材料与方法152.2 结果与分析182.2.1 病一症状描述182.2.2 苍术叶斑病发生情况调查202.2.3 科稀氏法则证病结果202.2.4 病原菌形态学鉴定结果202.2.5 病原菌序列分析及系统发育树构建分析比较212.3 结论与讨论26第三章苍术叶斑病生物学特性研究283.1 材料与方法283.2 结果与分析313.2.1 环境条件对病原由生长和产抱的影响313.2.2 环境条件对分生胞子萌发的影响343.3 结论与讨论37第四章苍术叶斑病侵染条件及流行动态38第一节苍术叶斑病发病条件研究384.1 材料与方法384.2 结果与分析404.2.1 侵染历程观察404.2.2 潜育期测定404.2.3 侵染条件研究414.3 结论与讨论44第二节苍术叶斑病流行动态研究454.1 材料与方法45目录4.2 结果与分析464.2.1 苍术叶斑病时间动态分析464.2.2 苍术叶斑病时间流行动态模型研究47423苍术叶斑病病情指数增长情况484.2.4 苍术叶斑病流行时期的推导484.2.5 冠整环境对苍术叶斑病田间潦行的影响484.3 结论与讨论50第五章病原菌侵染过程中寄主抗性酶响应515.1 材料与方法515.2 结果与分析535.2.1 PPO活性变化535.2.2 POD活性变化545.2.3 CAT活性变化555.2.4 PA1.活性变化565.2.5 叶龄对寄主抗性的晌应565.3 结论与讨论57第六章苍术叶斑病药剂筛选及田间防效测定596.1 材料与方法596.2 结果与分析616.2.1 室内药剂毒力测定616.2.2 田间药剂防治试验686.3 结论与讨论69参考文献71致谢错误!未定义书筌。攻读硕士学位期间发表论文情况错误!未定义书签。ContentAbstract1Abstract(Eng1.ish)3Chapter 1 Reviewonstudiesofmedicina1.p1.antdiseaseofSphaeropsida1.es.61.1 Morpho1.ogica1.characteristicsandspeciesofSphaeropsida1.es61.2 IdentificationofSphacropsida1.cs71.3 DiseaseandharmcausedbySphacropsida1.csofmedicina1.p1.ants91.4 Occurrenceregu1.arityofSphaeropsida1.esofmedicina1.p1.ants121.5 Contro1.measuresofSphaeropsida1.esofmedicina1.p1.ants13Chapter 2 Ourrenccandidentificationof1.cafspodisease152.1 Materia1.sandmethods152.2 Resu1.tsandana1.yses182.2.1 Diseasesymptomdescription182.2.2 Investigationontheoccurrenceof1.eafspot202.2.3 KOCh'sRu1.e202.2.4 Morpho1.ogica1.identificationofagent202.2.5 Mo1.ecu1.aridentificationofagent212.3 Conc1.usionanddiscussion26Chapter 3 Studyonthebio1.ogica1.characteristicsofP.Chrysanthemico1.a283.1 Materia1.sandmethods283.2 Resu1.tsandana1.yses313.2.1 Theeffectofenvironmenta1.conditionsonthemyce1.iumgrowthandSPOreproduction313.2.2 Theeffectofenvironmenta1.conditionsonthesporegc11nination343.3 Conc1.usionanddiscussion37Chapter 4 Infectionconditionsandepidemicdynamicsof1.eafspot384.1 tionIInfectionconditionsofP.Chrysaniheinico1.a384.1 Materia1.sandmethods384.2 Resu1.tsandana1.yses404.2.1 Inteciionprocessresearch404.2.2 Incubationperiod404.2.3 Infectionconditionresearch414.3 Conc1.usionanddiscussion444.2 tion2Epidemicdynamicsof1.eafspo1.454.3 Materia1.sandmethods454.4 Resu1.tsandana1.yses464.4.1 Timedynamicana1.ysisofA.chinensis1.eafSPOtdisease46CONTENTS4.4.2 Researchontimepopu1.ardynamicmode1.ofA.chitensis1.eafspotdisease.474.4.3 DieaseindexenhancementofA.Chinettsis1.eafspotdisease484.4.4 Popu1.artimederivationofA.chinensis1.eafspotdisease484.4.5 Effectsofcanopyenvironmentonpopu1.arfie1.dofA.chinensis1.eafspotdisease484.5 Conc1.usionanddiscussion5()Chapter 5 DeterminationofA.chinensisresistanceenzymeactivityduringtheinfectionprocess55.1 Materia1.sandmethods515.2 Resu1.tsandana1.yses535.2.1 ActivityofPPO535.2.2 ActivityofPOD545.2.3 ActivityofCAT555.2.4 ActivityofPA1.565.2.5 Theresponseofresistanceenzymeto1.eafposition565.3 Conc1.usionanddiscussion57Chapter 6 Studyonchemica1.contro1.of1.eafspotof.chinensis596.1 Materia1.sandmethods596.2 Resu1.tsandana1.yses616.2.1 Indoorpestircidctoxicitydetermination616.2.2 Chemica1.contro1.testsinthefie1.d686.3 Conc1.usionanddiscussion69Reference71Acknow1.edgements78Paperpub1.ishedduringmasterphase79摘要苍术(Atraciy1.txies1.Mcea(11unb.)DC.)为菊科苍术属多年生草本药用植物，药材基源植物主要包含北苍术和茅苍术，以干燥根茎入药。北苍术为辽宁地区道地药材。随着市场需求的增加和野生资源的枯竭，人工栽培面积逐渐扩大。在2013年苍术病虫杏调查中发现一种新病害，该病害主要危害叶片，出现大量圆形或椭圆形病斑，导致叶片枯死提早落叶，调食发现病害发生面枳及危害程度呈逐年上升趋势，严至影响苍术的产量和质量。查阅国内外文献，尚未发现该病杏的相关报道。本文结合病菌的形态特征、培养性状及多基因序列分析，对致病菌进行鉴定,并对病菌生物学特性、侵染条件及寄主抗性醐响应和田间药剂防治等研究，旨在为苍术病击防控奠定理论基础，保障辽宁苍术产业的健康可持续发展。I.苍术叶斑病发生危害及病原鉴定田间病害发生情况调查发现，该病害在辽宁抚KiiU沈阳、新宾等苍术种植区均有发生，1-3年生植侏均可危宙，底以叶片发病严重，形成大量中央灰白色，边缘褐色和黑褐色病斑，直径2-3mm,后期易融合，病斑中心可见黑褐色点状分生胞子器。发病严重时导致叶片早衰脱落.严重影响苍术种子成熟和根茎的产量。2014年调查病田率90%1.(X)%,病株率69%100%,病情指数32.355.9结合病原菌形态特征、培养性状和ITS、1.SU基因序列分析，构建进化树，鉴定苍术叶斑病菌为菊异茎点零(ParaphomaC1.irysunihemico1.a(Ho1.Ids)。2苍术叶38病病原菌生物学特性研究本文系统研究了病原菌生物学特性，分别测定不同的营养、温度、PH值、光照等条件对病的菌丝生长、范子产生地及分生池子萌发的影响。结果表明，最适于菌落生长的培养基为MEA培养基：最适碳源为可溶性淀粉：最适赳源为蛋白陈及NaNO黯病原菌对酸碱耐受性强，在pH41.1.均可生长，最适PH值为5,最适温度为25C,致死温度为48'C；胭对菌丝生长和分生抱子产生具有明显的抑制作用。最适池子产生的培养基为PNA培养基：最适碳源为可溶性淀粉及乳糖:最适就源为酵母浸膏：最适PH为7：最适温度为30C：暗条件利于抱了产生。分生饱子在
