光对花生疮痂病菌生长发育、毒素产生及致病性的影响.docx

第二章光对花生疮痂病菌生长发育和毒素合成的影响生长地球上的所有生物，包括真菌，通过使用大量的信号转导途径进行生理调节，在环境中进行生理调节，因此在生物学位置的范围内生存和增殖HJ光是影响生物体的最dt要的环境因素之一，它不仅是能量的主要来源，而且也是调节许多生物体生命过程模式的重要信息来源2此外，光强度，持续时间，极化和光谱组成等光性质被用作信息源,3尽管光在植物光合作用和光合作用中起作用，但对许多微生物，包括亚菌也是重要的4在真菌中，光控制生物过程的多样性，包括诱发或抑制性发育，分牛.胞子，向性，次生.代谢产物的合成,昼夜节律重建等。5.6.7.8.91光抑制烟曲霉和构巢曲霉中的他了萌发(15,16),而它促进粗糙脉刑菌和植物病原体三叶草中的菌丝分枝。因此，在光的存在下，殖民地看起来更紧凑(17.18).光照激活了营养蠲丝体中类胡萝卜素的生物合成(19.20)»在绿光中抑制灰前萄地的分生饱了发芽率和菌丝体生长速率。在构巢曲霉中，构巢曲霉菌素菌素和青霉素的产生受光照(22,23,24)的调节，在二次代谢物的合成研究中，光敏性花醍类毒素包括阿尔金曲霉，为毒素，替罗沙星，杏虫毒素，埃尔奇菌素，胞子菌素，青寄素，由广泛的植物病原真菌(26.25)产生的噬菌体和克拉屈色素，由榆树(E1.sinoefawcettii)产生的丝氨酸染色体对宿主和非宿主细胞具有高毒性，对真菌的完全毒力是必需的.110,11,12植物致病性属(EIsinoc)(子囊菌纲)及其分生期久的Sphacc1.oma的多种我菌产生埃尔奇菌素。EkinOChrOmS包含能够吸收光能(光敏剂)并产生活性氧(ROS)的酚里的核心发色团,例如羟基(OH九超辄化物(02-),过氧化氢(H2O2),和单线态班(IO2)410E1.sinochronis在柑橘叶上引起坏死性病变，促进柑橘细胞的电解质渗漏，对悬浮培养的柑橘和烟草细胞有毒性”0|。通过表征在聚酮化合物合成酶编码基因中被破坏并完全没有丝氨酸染色生成的禾谷镣刀菌突变体，验证J'e1.sinochrornes在促进真菌发病机制和SCab病变发作中的作用27)然而，关于光对E1.sinoc(无性型：SPhaCC1.Oma)生长和发育的其他方面的合成的影响的研尢很少。本研究使用不同的光强度，持续时间和光谱组成来检验其对丝氨酸合成前，生长和发育的影响，目的是揭示光对这种我菌的影响机制，并探讨这种知识对这种知识的任何可行应用控制这种病原体引起的作物损宙。发育的能力。为了阐明光与毒素生.长之间的相互作用，并通过光调节探索真菌的重要途径。1材料与方法1.1 材料供试菌株：2013和2014年生长季中，由花生般病组织样品分离到以下储株，供试菌株的编号等相关信息见表1。其中柑橘疮痂病菌1.2 痂囊腔菌素定量方法由于痂囊腔菌素无市售标准品，试验中采用与其结构和分子量相似的尾刑菌索为标准品，以紫外分光光度法绘制标准曲线。表2/供试菌株编号,寄主'分离部位、采柒地点及时间Iab1.c2-1Number,host,organ,co1.1.ection1.ocationandtimeoftestediso1.atesof菌株城耳I分寓都傅采梨堆点SRJfettJf"Iso1.atecodeHomOreanofsourceCo1.1.caion1.ocutionCo1.1.ecticncin1.N-JH-COIIA-SY-AOI1.NH-HO1.nGM4花花花柑1:生生橘叶叶叶叶片片片片江宁锦州辽于沈阳辽宁阜新1.2 光照条件对病原菌生长发育的影响1.2.1 光质对病原菌萌丝生长和抱子萌发的影响将供试菌株（处理方法）接于PDA培养基平板上，分别置于红光、蓝光、绿光、紫光、白光以及黑暗条件下25C培养，观察记录每5天的菌丝生长情况，计算平均生长速率，每处理重复3次。产抱方法参考1.2.2 光强对病原菌菌丝生长和泡子萌发的影响将供试菌株（处理方法）接于PDA培养基平板上，分别置于光量子通量为0、I、3、9,27、81、251、500条件下25C培养，观察记录每5天的菌丝生长情况，计算平均生长速率，每处理重曳3次。1.2.3 光照时间对病原菌菌丝生长和池子萌发的影响将供试菌株（处理方法）接于PDA培养基平板上，分别置于光照时间为OIvd、3h/d、6h/d、91.d.12hd,I5hd,18IVd,21hd,24IVd恒if1.培养箱中培养，观察记录每5天的菌丝生长情况，计算平均生长速率，每处理盘复3次。1.3 光照条件对花生疮痴病菌而素含量的影响131光质对病原菌毒素含任的影响将供试菌株（处理方法）接于PDA培养基平板上，分别置于红光、蓝光、绿光、紫光、白光以及黑暗条件下25C培养，20天后取菌落烘干后用丙酮连续萃取2次，每次I6h,合并萃取液减压蒸发定容至5m1.,采用分光光度法测定毒素含量,每处理重复3次。1.3.1 光强对病原菌用素含量的影响将供试菌株（处理方法）接于PDA培养基平板上，分别置于光量子通量为0、I、3、9、27,81、251,5（X）条件下25C培养，20天后取菌落烘干后用丙桐连续萃取2次，每次I6h,合并萃取液减压蒸发定容至5m1.采用分光光度法测定毒素含量，每处理重复3次。1.3.2 光照时间对病原菌毒素含量的影响将供试菌株（处理方法）接于PDA培养基平板上，分别置于光照时间为Oh,，'d、3hd.6hd.9hd.12hd.15hd.18hd.21Nd、24h/d恒温培养箱中培养，20天后取菌落烘干后用丙酮连续萃取2次，每次16h,合并萃取液减压蒸发定容至5m1.,采用分光光度法测定毒素含量，每处理重灾3次。2结果2.1 光照条件对病原菌生长发育的影响2.1.1 光质对病原菌菌丝生长和抱子萌发的影响供试菌株在不同光质的培养条件卜.菌落形态和生长速率存在显著差异，且不同菌株间存在相似的变化趋势（表2-2,图2-2）.与黑暗培养的菌株相比，经白、蓝、紫三种单色光处理后的野生型曲株的菌落落形态，的落颜色，气生的丝密度均无明显差异，菌落直径均大于黑暗条件卜的菌落直径，但经红光照射处理后菌落与对照菌株明显不同，红光处理后的菌落菌丝致密，菌落与气生菌丝均呈白色，绿光下菌落生长速率降低。蓝光红光绿光白光黑暗39白蓝红绿黑暗白蓝红绿缥暗O白&红绿黑暗113白盔红绿黑暗3()5U-.2PUoo。W三f-三1.252()15IO50111.N-JH-COI1.N-FT-HO1.01.N-SY-AO1.E)Ggreenredb1.uepurp1.ewhiteb1.ackdifferent1.ightconditions050505032211(1.U1.U)J3ow三pAUOO。-s>un工greenredb1.uepurp1.eJwhitebhek1.N-JH-CO1.1.N-FT-HOI1.N-SY-AOIFY-GM-4different1.ightconditions图2-2光质对函丝生长的影响Fig.22Effec(of1.ightqua1.iyonmyce1.ia1.growth表2-2光质对崩丝生长的影响'Iab1.c2-2Effectof1.ightqua1.ityonmyce1.ia1.growthFunga1.co1.onydiameter<mm>Funga1.sGrccnRcdB1.uePurp1.eWhiteDark1.NJHC<)I12.63±0.24!5.27+0.5021.03±0.272333+0.5021.77±0.8121.85±0.401.N-SYAO1.12.63±0.2814.97±0.6119.40±0.6723.97±0.3123.73±0.4524.50±0.571.N-FTHOI12.87±0.8517.40±0.2324.00±0.5525.50±0.4425.62±0.4126.42±0.52FYGMYI8.!O±O.3219.33+0.5226.03±0.6420.63±0.5723.60+03522.78±0.412.1.2 光强对病原菌菌丝生长和m子萌发的影响供试病原菌在不同光强处理下均表现出相似的光适应性，与黑暗处理相比，在低光照强度的变化范围内，各菌株在菌落形态、菌落颜色上无明显差异。即可以检测微妙的强度变化,并进行适当的行为和发育响应，具有适应长时间暴露于光照的机制，同时保持对强度变化的敏感性。39278139278192781392au三三uoo-三U-O1.N-JH-COI81927Iig1.i1.Ii1.ensi1.y图24光强对硝丝生长的影响Hg.2-4EfFcctof1.ightindensityonmyce1.ia1.growth表24光强对函丝生长的影响Tab1.e2-4Effectof1.ightindensityonmyce1.ia1.growthFungf1.1.sFungu1.co1.onydiameter(mm)0I392760812511.N-SY-AOI24.5(H<).5223.IO±O.8I23.7MM1.22.1310.559.331O.55I7.3O1O.4613981O.731.1.93±O.381.NJHCo1.2I.85±<).4O21.<X>±0.6521.77±<).81.20.6810.5117.7310.30I67(>±<>.4OI4.27±O.5<)1.1.67±().201.N-FT-HOI26.42*0562557±1.1325.62±0.4423.87i0.152O.77tO.2218.25i032I4.8O*O.S613.3±O23FYGM422.7±O.4I23.0810.5823.6OH).3523.7(HO.2I2I.731O.7520.0510.19I7.97±O.3516.6310.262.2 光照条件对病原菌毒素合成的影响2.2.1 光质对病原菌毒素合成的影响菌株图2-5光质对葩原菌毒素含盘的影响Fig.Effectof1.ightqua1.ityontoxin表2-S光侦对病原的满泰含业的影响Tab1.eEffectof1.ightqua1.ityontoxin菌株编号Iso1.atecode毒素含金whiteb1.uegreenB1.ackred1.N-JH-CO1.11.6611.563.46O01.N-FT-HOI5.115.170.64001.N-SY-AO1.4.005.072.0700FY-GM-47.569.886.301.23i.052.2.2 光强对病原菌毒索含信的影响的株图A毒素含量柱状图B提取后毒素的领色菌株编号Iso1.atecodei素含量0