GB_T 42349-2023 光催化材料抗病毒活性的测定 Q-β噬菌体试验方法.docx

ICSH1.060.30CCSQ32G日中华人民共和家标准GB/T423492023/ISO18061:2014光催化材料抗病毒活性的测定Q噬菌体试验方法Determinationofantivira1.activityofPhOtOCata1.ytiCmateria1.sTestneth<1.usingbacteriophageQ-beta(ISO18061:2014,FineCeramicS(advancedceramics,advancedtechnica1.ceramics)Determinationofantivira1.activityOfseniiconductingPhotocata1.yticmateria1.sTestmethodusingbacteriophageQ-beta,1.1.)T202303-17发布2023-10-01实施国家市场监督管理总局国家标准化管理委员会发布前吉III1范围12规范性引用文件13术语和定义14符号25原理26材料36.1 试验微生物和试验准备36.2 培养基47仪器设备57.1 试验装置57.2 覆盖膜67.3 保湿玻炳板67.4 玻璃管或玻璃棒67.5 游纸67.6 荧光紫外灯67.7 紫外照度计67.8 打孔金属板67.9 离心机77.10 无苗过谑器78试样79测成程序79.1 通则79.2 菌能液的制备程序89.3 测试用咏菌体悬液的制备89.4 光催化抗病毒活性测试流程895紫外照射条件99.6 噬菌体滴度的测试9IO结果计算IO10.1 通则1010.2 噬菌体滴度的计尊1010.3 测试有效性的要求1010.4 光假化抗病毒活性值计算I1.10.5 非光催化抗病毒活性值计算I1.11测试报告11附录A（资料性）流感病毒和QR噬菌体的比较数据12附录B（资料性）使用噬菌体ATCC23631-B1.和NBRC20012测定的的光催化活性比较13I!本文件按照GB,，T1-2020£标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则3的规定起草。本文件等同采用ISO18061:201.1匕制细陶在（高级陶建、高级工业陶瓷半导体光催化材料抗病毒活性的测定QB噬菌体试5金方法*.本文件做了下列改小限度的编辑性改动：为与现有标准体系协调,将标准名称改为彳光催化材料抗病毒活性的测定Qp噬菌体试验雄.请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的贡任.本文件由中国建筑材料联合会提出.本文件由全国工业陶匏标准化技术委员会（SAC/TC19。归口.本文件起草单位：广东省科学院微生物研究所（广东省微生物分析检测中心八广州市奥因环保科技有限公M、北京为康环保科技有限公司、中国国检测试控股集团股份行限公M、中星（广州）纳米材料有限公司、北新集团建材股份有限公司、同曦集团有限公司,北京康洁源环保科技有限公司,吉林省绿森林环保科技有限公司、中国建筑材料科学研究总院有眼公司、北京中科实力应用技术研究院、浙江理工大学上虞工业技术研究院有限公司、淅江赛瑞途科技彳i限公司、绍兴监竹新材料科技有限公司、中关村人居环境工程与材料研究院、山东工业陶在研究设计院行限公司、国家纳米科学中心、中国感光学会.本文件主要起草人：谢小保、关红艳、郑苏江、单兴刚、沈海红、工继梅、朴玲林、押文斌、安太成、张佐英、张吉祥、大坟秀、利盛丽、烟'陈广川、陈常祝、力辉李明、王莹、反秋、王仲旭、世玄华、潘国T、孙茂、裔月红.光催化材料抗病毒活性的溜定Q-PIe菌体试验方法1Mn本文件描述了含有光催化剂或表面有光催化剂或光催化材料涂腹表面的抗病而活性的测试方法，本方法通过计数经紫外光照之后的Q平咏曲体的减少来确定其抗病毒活性，)木试脍方法以Q6噬薄体作为K感病毒的酎的揖使用。本文件适用于建材中使用的不I可种类的半导体光催化材料，其获本形制包括片状、块状或平板状等，但不包括粉末、颗粒或多孔光催化材料.本文件适用于具有抗病毒性能的光催化材料的检测，不适用于抗细而、抗其菌、水中污染物降解、自清洁、防符和空气净化性能的检测.本文件中的量值表达采用国际单位制(SI)的位.2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文f1.仪该日期时成的板本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版木(包括所有的修收单)适用于本文件。ISO10677精细陶涩(先进陶瓷、先进技术陶陞)华导体光催化材料检测用紫外灯光源Finece-ramics(advancedCCmmICS.advancedtechnica1.ceramics)-U1.travio1.et1.ightsourcefortestingsemiconductingphotocata1.y(icmateria1.sISO27447:2009精细陶爱(先进陶匏、先迸技术陶宛)华导体光催化材料抗储活性的试蛤方法(FineCeramie"advancedCeramiCS.advancedIeChniCa1.ceramics)Testne(h<x1.forantibacteria1.activityofsemiconductingPho(OCaIaIy1.iCmateria1.s)ISO800001城和单位第1部分；总则(QUanEieSandunitsPart1.Genera1.)3术语和定义下列术语和定义适用于本文件.3.1光催化剂PhOtoaH心St在一定光源激发卜,能产生催化作用的物质，包括分解和去除空气与水中的污染物、除臭、抗储、自清洁以及防雾等.3.2光催化材料Ffotocata1.yticBateria1.s包含或使用了光催化剂并具有无催化性能的材料.注：此类光阳科用于建筑和诩施川具备&哧述功能3.3抗病毒antivira1.降低病毒侵染活性的能力.3.4螳画体bacteriophage可以感染细阈的一类病毒.注1:本方法MJ的XW曲体省种喻¾体,（HS蜘抑时人麻惭不致麻It提其性状与人的致病愉黑病毒相仇注2:流物i特与&B噬菌体的测试结果见附孤3.5WSPkiq1.检由单个噬菌体侵杂弁裂解宿主细胞形成的清晰可见的区域.3.6光催化抗病毒活性值PhotoCata1.yStantivira1.activityva1.ue光催化材料和未经光催化剂处理的对照材料在紫外光照后得到的噬菌药数I1.t的对数（ft的基（ft.法谢R包含了秘糠外趣和忏喋1.三数中的版少，3.7外也期济下的沼副就豳能ittphtocata1.y8tativindactivityVa1.ueforWirradiaticn光催化材料在紫外光照射条件卜和暗条件卜噬菌曲数盘的对数值的差值。4符号下列符号适用于本文件：A:立即接种后未处理试样的噬曲体的平均滴度iBp:暗条件放跟后，未经处理试样的噬菌体的平均滴度：Bz:羟紫外光照强度1.照射后未经处理试样的噬曲体的平均滴度：Cp:暗条件放我后，无催化试样的噬菌体的平均滴度；C,:经紫外光照强度1.照射后光催化试样的噬菌体的平均滴度：Dp:稀择倍数：1.:紫外光照强度：1。中nx：噬曲体滴度对数/大依：IOgmCam:3片未经处理试样上噬菌体滴度的对数平均值：Iogmm:噬曲体滴度对数最小值；N:噬曲体滴度,单位为噬菌斑形成单位数：Vp:测试样品在喑条件下放置后，非光催化性的抗病毒活性tf1.：V:经过光照强度1.照射后的光催化抗杭毒活性值：V:紫外光照贡献的光催化抗病毒活性但：Z两个平行平皿卜.噬菌体的平均数.5*9该方法通过将片状、块状或平板状材料类的试样Ij哩雨体接触并也于紫外光下照射,从而找得光催化材料的抗病毒活性值.在光催化处理的样品上接种噬菌体悬液,然后暴露于已知强度的紫外光下，持续照射一定时间。光照结束后，取出样品并用aB噬菌体的械感宿主大肠杆菌测定洗脱液的喙菌房形成单位。通过比较未经光催化剂处理的材料和光催化材料在经过特定强度照射后的噬菌体数，及未经光催化处理的材料和光催化材料在暗条件下相同时间的噬菌体数进行计算而汨到测试结果，66.1&1.1试”生物试验所使用的茵株应与表1中的相同或等效,宜从世界翦种保蕨联合公(WFCc)成员机构获得.微生物的无曲操作应在合适的生物安全柜中进行。«1主微生物Z例的株Si号WB除的体ATCC2S63卜H1.WSM13768XBRC20012大肠杆条ATCX?23631DSM5210NIWC106373注IATOC23631-B1«RC20012并不严格致.但是它们来浜相刚1光催化性徒相当(见附录B).&1.2Wft*细俏的准备步骤如下：a)将大肠杆菌接种到斜面培养基上K610)m1.1.B琼脂(见6.2.6),在(37±DC条件培养(16-24)h,存放于在(5-10)C沐箱内；b)1.个月内可以按照上述步骤制的维代菌株：c)超过1个月的斜面培养物不应使用：d)从原代的株开始菌种的传代次数不超过10次。注：如果细的在超低温冰箱保存，从原代储株?F始的种的传代次数为1啾.&1.3噬菌体的准备步骤如下：a)在30。m1.推形瓶中分装25m1.含钙1.B溶液(见6.2.力，接种大肠杆菌；b)使用(U0±102min的振荡掘床，在(37±1)(条件下振荡培养(18±2)h:O在300m1.,推形瓶中加入25m1.1.B培养基.预热至(35-37)C,接种0.025m1.Ab)中制备好的培界物：d)按上述条件培养，直至归浓达(2.0+1.0)*108%，1也可多次市我此步骤,以评估浊度和菌浓之间的关系如果数据充分,此后的测试可凭浊度判断i期浓；e)在细菌培养物上接种Q-咏的体，使噬菌体的终浓度约为2XIO7PfWm1.感染倍数(moi.)约为0.1；f）按b）的条件培养细菌4h：g）将培养物在（4士2）C环境中过夜放置：h）转移培养物至离心管中，并于（4±2）C,IO（X）Og条件下离心20min;i）取上消液.放入灭菌的试管中：j）将含有噬曲体的上消液过泄以纯化噬苗体溶液；k）测试咏做体储在液的滴度，井在（，1±2）C条件下保存；1）检测是否有细菌污染,IU1.m1.噬菌体储备液混入1.B琼脂（见6.2.6）培养基.匕并在（37±DC条件下培养24h.如果有菌落生长则弃摭噬菌体体各液：m）噬阳体储备液的滴度应大于1.OX1.0,OPrU三1.且保持不被污染.注1：噬南体储备液的滴度宜大于1OX10"pftim1.甚至达到1.0XKTpfiid.注2：随冽r间延愠或菌体储备液断度会慢降低.6.2培养苔&21可使用下文所述的培养基.制备的培养基的体积可根据所测试样品的数出做相应的调招.6.2.2 1/500普养肉汤（V5NB）将100Om1.纯水、3.0g肉汁提取物、KkOg蛋白豚、5.0g狐化钠加入到椎形瓶中,充分溶解.溶解后.取氢氧化钠或耗酸溶液调节PM至7.1±0.1（25匕时）.使用纯水物上述溶液稀释500倍.使用氢氧化钠或盐酸溶液谢节PH至7.0±0.2（25C时），在（12