临床检验基础学知识点.docx
临床检5金学临床检验医学C1.iniai1.1.aboratorymedicine血液三大尿液常炎便规体液脱落细胞学皿型与血库临床检验医学的定义及探讨范围络床检骁探学的发展史及现状庭床检验荔础教学的目的学好临床桧验基础的要求临床检验基础的发展史古代最早是检测尿液起先的。17世纪的显微镜的独创推动了临床检检的发展,Antonyvan1.eeuwenhock上世纪50年头.库尔特Cou1.ter)电阻抗原理的提出,使临床检验从手工步入自动化、电脑化,使得检验变得简便、快速、精密度高更.目前,试剂更加批员化、配套化、专业化和多样化检粉液更加重视检验方法的标准化和质量限制,实施全面的质质限制和质量管理.试剂和仪器的更新使得检脸更便捷:如床边检测(POintofhgest.P0CT>.使检测标本更簇新、交叉污染率低、更接近病人的生理和病埋状况.匾床就骁般础的现状<:>实施与保证全面质量管理1 .分析而:生理变更、饮食因索、药物因索、标本采集与保存等.2 .分析中:检测方法、仪器设备性能与脑破、试剂质中等.3,分析后:发报告的把关。肛核其信息内容如姓名、性别、年龄、住院号、马疾病符合度等。临床检验的特点:1.操作的自动化2.方法的标准化3.技术的现代化4.试剂的商品化5.计量单位的国际化6.质fit管埋的全程化7.生物平安的严格化8.检验人员的合格化结论临床检验医学的定义及探讳范困临床检验医学的发展史及现状临床检验基础教学的目的学好临床检骁地础的要求治检的基础教学目的:I.疾病诊断和鉴别渗断2.疾病疗效赛测和演后视察3.疾病竣防4.科学探讨教学目标:雪双:皮肤采血方法,Hb成分、种类及测定Ifc床意义。熟识:血液的组成、理化性筋和功能.Hb的结构,参考范困.第,章ChaP1.er1.血液标本采集和血涂片制的b1.t1.co1.Ieciionandb1.o<x1.smeaprearaion血液组成离心后(写)血液主要埋化性痂激色:动脉血一一鲜红色静脓血一一暗红色血浆一一浅黄色高麻瞧食乳白色溶由一血浆呈不同程度红色JA:.成人约占体重的7%-9%,平均由ht51.左右.pH:7.35-7.45比密:1.0ST.06渗透HK290-3IOmosinKgH20第一节血液标本采集b1.oodco1.1.cc(ion由液标本的采集是分析前物收限制的£要环节一、标本聚集的一般要求1 .检验申请华:患者、临床信息完整2 .标本采集和处埋详细要求:标本种类标识、采集时间、急诊和危重患者信总、3 .标本信息完整性:标本的防腐、保温等,4 .标本拒收:依据标本接收的文件不符合者.二、血液标本类型1 .全血(who1.eb1.ood):静脉、动脉、毛细血管2 .血浆(P1.asma);全血加入抗凝剂离心后的上游液。3 .血清(ScrUm卜血液凝固后离心所得上清液。4 .分别或浓缩的血细胞成分:如血小板、白细胞.单个核细胞等.H、血液标本采集方法(一)皮肤采血(一)除脉采血(三)动脉栗血(一)皮肤采血法适用于曲量V0.1m1.的检脸项目如RBC计数、WBC计数、P1.t计数、Hb.ESR做址法等的测定等.器材:采血/专用的“采血针”或三棱针,用前应高蜃灭菌,一人一针.专用采血针三棱针采血部位(1)手指采血:WHO举荐实行外周血以左手无名指或中指指采血部位尖内例优点:便利、获较多血收结果比较恒定缺点:与静脉血仍存在某些差异。(2)耳垂采血:优点:痛感轻、便利、适用于反复采集缺点:血循环差受气温影响大、检杳结果不恒定、RBC.WBC.Hb,Hci结果均比价脉血高,特殊是冬季,(3)其他拇指、拇趾或足照采血半岁以下婴幼儿皮肤完整处产爆烧伤者采血操作1、打克:2、采血部位按摩:3、消毒皮肤:4、针剌:5、擦去第一滴血后吸血:6、压住伤口片刻:留意M项(I)采血部位皮肤完整。(2)无第技术操作:防枭血部位呼染,一人一针.(3)采肌针刺入皮肤应深浅适中.(4)多项检近时,采血次序为:PIt计数一RBC计数、Hb-WBC计数与分类.(5)取血用于自动化血细胞分析仪,要防止桶球纤维混入堵充仪器,其次京ChaP1.er2血液-般检b1.oodgenera1.examination第一节红细胞检查Redb1.oodce1.1.(Crythrocytc)Cxaniination红细胞检食内容:RBC是血液中最多的一种血细胞,其检杳包括红细胞计数、血红蛋白测定、红细胞形态视察.红细胞平均指数计算、网织红细脑计数、红细胞沉降率等.形态:无核,双凹圆盘形不染色:呈卓黄色RBC的生成及破坏:(W.PPT)早幼红细胞中幼红细胞干细胞原始红细则晚幼红细恂网织红细脆成熟红细胞一*红细胞计数(redb1.dce1.1.count)【原理(princip1.e)血液用等逐稀群液稀糅确定倍数一滴入血细胞计数盘一显微镜下计数确定范困内的RBC数一换笄得短升血液中的RBC数,【蛰考范阳(range)成年女性:(3.5-5.O>×10124-成年男性:(4Q55>×IOI21.新生儿:(6.07.0)×IO121.婴儿:(4.04.3)XI012/1.儿凄:(4.045)×IOI2,(临床意义(c1.mica1.meaning)-X生理性变更(一)生理性增多1 .机体缺氧而使RBC代偿性1:新生儿、岛原生活、猛烈的体力劳动2 .成年男性比女性而:男性在67岁时最低,253O岁时达裔峰,女性2135岁维持最低水平。3 .其他:抽烟、肾上腺素及糖皮质激素的应用等(二)生埋性削减1.生长发Ff造血原料相对不足:从6个月至2岁婴幼儿2 .选血功能诚退:部分老年人生理性贫血3 .血容员增加:妊嫄中晚期二、病理性变更(一)病理性增多1 .相对增多:血液浓缩2 .确定性增多:维发件增多:如心肺疾病原发性增多:如真性RBC增多疝鬲于6.8XIO1.2A.应实行治疗措施(二)病理性削减1.RBC生成削减:什髓功能哀竭:AA造血物质缺乏或利用障碍:IDAsMA3 .RBC破坏过多:内在缺陷外在异样4 .RBC丢失过多:低于1.5XIO1.应考虑怆血:、血红蛋白测定HemOgIobinnIeaWrement(-IHb分子结构及成分:的红蛋白(hemog1.obin.Hb或HGB)是人体行核红细胞及网织红细胞内合成的含色素辅基的结合蛋白质,由珠蛋白和亚帙血红素组成.0.347g铁相当于100gHb海克Hb可携带1.34m1.SE1.5 .其它:还原Hb:Fc2+氧合HM与02结合的HbHb衍生物:HbCO.SHb高铁Hb:Fe3+2014年6月17I1.59P24(一)Hb的测定:ICSH<Internationa1.counci1.forStandardizaJionhaenaok>gy)举存辄化高铁血红蛋臼测定法(HiCN)1.原理:Hb是色素蛋白,在I1.液中以多种形式存在.利用高铁M化钾将Hb班化成高铁血红蛋白<Hi),Hi可与CN-结合成班化高铁血红蛋白,在54Onm处有一汲取蜂,用分光光度计测定其吸光度,换算成每升血液中血红蛋臼的含浆,方法学评价(1)机化高铁由红蛋白测定法优点:操作简洁、显色稳定,便于推广.转化液较植定,易保存,除SHb外各I1.b均可测读A后干脆计数,HiCN参考品可长期保存,便于质控.枚点:KCN剧毒.易污染环境.不婚WSHb,HbCO转化悔。浊度而引起Hb浓度假性增高:高球蛋白血症,脂血,试剂混浊,WBC和PI1.高。(2)十二烷基硫酸钠血纤蛋白(SDS-Hb)刈定法SDS能破坏WBC.摩尔消光系数未定得(3)碱羟血红蛋白测定法;HbF不能转化,最大汲取峥在575nm,(4)胜觥高铁Hb测定法:具有与HiCN法相像的优点,但仍存在试剂污染.(5)浜代十六烷超三甲铁血红近白测定法:不破坏WBC精密度、精确性略低.2014年6月17H65P254.参考值新生儿:17O2OOg1.女:U01.50g1.男:120-160g1.70岁以上老年人:男:94122g1.女:87-112g'1.质房限制(1>血清浊度:(2)器材及试剂质辰:(3技术与操作:(4)废弃物的处理:峪床意义与RBC计数相像(I)签别贫血类鞭:IDA:RBCIHbI1.MA:RBCIIHb1.(2)影响检验结果的因素:血液总容量变更全身血浆衣房变更教学目标:驾取:血红蛋白测定的原理、Hb成分、种类及测定临床意义:网织红细胞的形态、计数方法及测定的临床意义.熟识:血涂片制备与染色、红细胞的形态学变更.了解:Hb测定的方法学评价,血红蛋白浏定HemogIObinmeasurement(一)Hb分子结构及成分:血红蛋白(hemog1.obin.Hh或HGB)是人体有核红细胞及网织红细胞内合成的含色素辅基的站冷蛋臼质,由珠蛋白和亚铁血红素组成。第:节血涂片制法与染色preparationandstainingOfb100dsmears皿涂片的制备(一)或玻片和推片:我成片推片榭S片;清洁、干燥、中性、无油腻。推片:边绿光滑.(二)血涂片制作:良好血涂片:血联至少长25mm.边缘整齐,两恻、两端留有空隙.头体足分明:细胞从厚区到薄区逐步匀称分布.血膜末端无粒状,画嫉或裂隙。(三)制需血涂片的影响因素推制适当的血膜角度大,速度快太昂太短推片边缘不光整一刷尖用力不均一厚薄不匀曲及过多、血淞粘度商一无尾我戢片有油腻血涂片染色染色就是染料透入被决物并存留其内部的过程.瑞氏染色法是血液柒色鼠羟典和最常用的染色法.2 .畜姬快染色法3 .瑞氏古姆林以合染色法4 .细胞活体染色法5 .巴氏染色法6 .苏木素伊红染色法(一)瑞氏染色法(WrightStain>1 .瑞氏染料成分:美盔(又称亚甲蓝,methy1.eneb1.ue.M+)通用为氯盐,氮化美蓝(Mc1),阳离子,一种碱性染料。伊红(eosinE"):通常为钠盐(NaE).阴禽子.一种酸性染料.WrighJ染料MCI+NaEME+NaCIW甲静(溶剂、固定剂):ME1+E具有强大的脱水力.可将细胤固定为确定形态:使近白沉淀为做粒状、网状等结构:增加染色效果;染色原理:物理的吸附作用和化学的亲和作用正常状况染色结果:外观:淡紫红色镜下:RBC里粉红色,略有修状感,WBC浆中颗粒清晰,并显示各种细胞特有的色词。细胞核染紫”色.就染色质结构清晰.RBC唔碱性瑕粒:中性颗粒暗酸性颗粒3 .PH对细胞染色的影响:PH1.-正电荷地多一切与伊红结合一柒色偏红PH1.T负电荷塔多易与美蓝结合一倒瓶桀色的顺取保证染液质量染色时间与染液浓度染色过程染液的冲洗脱色与熨染4 .方法学评价:瑞氏染色法:优点:对于细胞质成分及中性购粒等的染色可扶得很好的柒色效果.决点:对细胞核的染色不如百姬伊,染色古姆萨染色:原理:同瑞氏染色.优点:本法对细胞核柒色较好,结构更清晰.块点;制质和中性颗粒染色较差。瑞-古