GB_T19782-2023中国对虾.docx
ICS65.150CCSB51中华人民共和国家标准GB/T197822023代替GB/T197822005中国对虾Chineseprawn20231228发布2024-04-01实施国家市场监督管理总局岩花国家标准化管理委员会发布本文件按照GB/T1.1-2020«标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件代鲁GB/T197822005中国对虾,与GB/T197822005相比，除结构调整和编辑性改动外，主要技术变化如下：a)b)c)d)e)D更改了“分类地位”（见4.2,2005年版的2.2）,增加了“外部形态”中的图片标引序号（见5.1）;更改了“可量性状”（见5.2,2005年版的3.2）；删除了“生长与繁殖”中的“亲奸”部分（见2005年版的4.2.1）»删除了“细胞遗传学特性”中的核型公式及染色体组型图（见2005年版的5.1）删除了“生化遗传学特性”（见2005年版的5.2）g）删除了“同工酶分析”（见2005年版的6.2）,h）增加了“分子遗传学特性”（见第8章）；i）更改了“检测方法”（见第9章,2005年版的第6章）Ij）增加了“判定规则”（见第10章以k）更改了细胞遗传学特性检泄方法（见附录B）,I）删除了“同工酶染色液及其所需溶液的配制”（见2005年版的附录Oim）增加了“线粒体16SrRNA序列分析”（见附录C）。请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中华人民共和国农业农村部提出.本文件由全国水产标准化技术委员会（SAC/TCI56）归口.本文件起草单位：中国水产科学研究院黄海水产研究所.本文件主要起草人:李健、刘萍、何玉英、王琼、王清印.本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为：2005年首次发布为GB/T197822005,本次为第一次修订.中国对虾1范圉本文件界定了中国对奸Fenn,"eneusMnensis(OSbeCL】765)的术语和定义，确立了学名与分类，规定了主要形态结构特征、生长与繁殖特性、细胞遗传学特性与分子遗传学特性，描述了相应的检测方法，给出了判定规则.本文件适用于中国对虾的种质鉴定和检测.2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件.GB/T18654.2养殖鱼类种质检脸第2部分:抽样方法GB/T18654.12养殖鱼类种质检验第12部分：染色体组型分析GB/T22213水产养殖术语SC/T1102虾类性状浏定3术语和定义GB/T22213界定的术语和定义适用于本文件.4学名与分类4.1 学名中国对虾Fenneropenatuschinensis(Osbeckt1765).4.2 分类地位节肢动物门(ArthrOPOda),软甲纲(MaIaCOStraCa),十足目(DeCaPOda),对虾科(Penaeidae),明对虾属(Fenneropenaeus).5主要形态结构特征5.1外部形态身体侧扁,分为头胸部和腹部两部分.额角上缘末端尖细无齿，下绿齿较小.第二触角鲫片末缘超出第一触角柄但不及额角的末端.眼胃脊明显，第四腹节至第六腹节背部中央具有纵脊，尾节末端甚尖，两侧无活动刺.雄虾第一腹节的内肢变形特化成交接器，略呈钟形，雌奸第四步足和第五步足之间基部的腹甲上,有一圆盘状交接器，为纳格囊。外部形态见图1标引序号说明I1 -第二触角鞭泳足第触角第一蛀第脚节上触鞭长0j0.7 倍,与新角长度边缘至肝刺间距离的3/55.3可数性状3齿5齿5.3.2解的可数性状见表L名称胸节12345678向能/对111I11关节能，对I222221足螺/对1一VixtI111116生长与铁殖特性6.1生长蜕皮间断性生长.雌妤的生长速率显著高于雄虾C共体长、体重及生长关系式见附录Ac6.2.1.1自然海域中，在IOJJ L月初雌虾最后一次蜕皮配翌年5月至6月，水温升6.2繁殖6.2.1繁殖期6.2.1.2人工养殖条件，尔】旬至11月初进行交配至 Z,水温升至16 iC时开至13(时开始产卵.为多次3.0X10XI。粒沉性褐色或灰mm0.440 nm;细胞遗体细胞线粒体16S rR>P港考序列如下(520 bp)：GtcitviatgaA(K1GCCGCGGAATTGA(XJCTAiTVrTTGTATGA.AAGTCTAGCC T(CGAGrlTTAATIAGTCTTTTGGACAAAGCT GTCTCAATTATAAWVrTGAATTTAACTTTTaagtgaaaa(;GCTTAAgAArTAAGGGGCGAGCCCTATXAAGCTTGCAI)TTlAATrATACtatcaattg250TTAGTGTAACTT(JGTTTTAATTATTTGTTCGTT(iGG GCGAe(X)GAA 3001IACGTGTTCTAATATTTATACyVDT AATTGGAAAA 350CTAGCArGATACAGCGTACgatgttgaaCctctattagCTTCTTTGAGTT4AGG1CTGTTAGAnAAGTTACTmGGGATA400GTCCTCC GACGAGG TrTGCGAeCT 450CTTATGAT(T A(KAGTTGTA AAGGAAGGTC 500TGTTCGACCTTTATCCTT520始产卵”6.2.2怀卵种内K2P遗传能离小于1.5%。9检浏方法9.1 抽样按GB/T18654.2的规定执行.9.2 主要形态结构特征按SC/T11O2的规定执行.9.3 生长与繁殖特性9.3.1 生长按SC/T11O2的规定执行.9.3.2 繁殖期查询捕捞或养殖记录.9.3.3 怀卵解剖雌虾,将整个卵巢取出，揉碎溶于海水中，经稀释后取一定体积在显微镜下统计卵的数垃,计算卵的浓度,进而计算怀卵量,测3次取平均值.9.3.4 受精卵特征在显微镜下观察.9.4 细胞遗传学特性按附录B的规定执行.9.5 分子遗传学特性按附录C的规定执行.10判定规则10.1 当检测结果符合第5章和第7章的要求，可判定该种质时,按第5章和第7章的要求判定.10.2 当出现下列情况之一时，需增加第6章和第8章检测内容,依据检测结果进行辅助判定，a）第5章和第7章的项目无法进行检测或准确判定时,b）第三方提出要求时。附录A（资料性）中国对务体长、体重及生长关系式A.1雌性、雄性中国对外在自然海区中的体长与体重关系式分别以公式（A.1）和公式（A.2）表示.W=11.0×IO-4L3om4(K1=0.999)(A.1)W-11.3×10-*Ltm,(Ri=0.998)(A.2)式中IW体重,单位为克(g),L体长,单位为亳米(mm).A.2雌性、雄性中国对虾在自然海区的体长生长关系式分别以公式（A.3）和公式（A.4）表示.1.1=240.95l-eYQ,°,<Lcm(r,三0.998)(A.3)1.,=18479口一匚°川"1卬)(R?=0.975)(A.4)式中：I日龄，m位为天(d)；Lr-t日龄时的体长，单位为亳米(mm附录B（蜕范性）染色体的检测BJ吉姆萨（GkmSa）染色液的配制8.1.1 GiemS染色液母液称取0.5gGiemsa粉，量取甘油33mL,在研钵中先用少斌甘油与Giemsa粉混合,研磨至无颗粒时再将剩余甘油加入，在56C条件下温浴2h后，再加入33mL甲醉,并混匀.保存于棕色瓶中备用.8.1.2 磷酸缓冲液（0.2mol/L.pH7.2）B.1.2.1A液（0.2molL,NalHPO4）:36.1g含1个结晶水的磷酸氢二钠（NazHPO,HQ）定容于1OoOmL的蒸慵水中；或取71.63g含2个结晶水的硝酸氢二钠（Na?HPO,240）,定容于1000mL的蒸慵水中.B.122B液（0.2molL,NaHNPO取27.6g含1个结晶水的磷酸二氧钠（NaHZPOHQ）定容于1000mL的蒸馅水中,或取31.21g含2个结晶水的硝酸二氧钠（NaH,PO,2凡0）定容于1OOOmL的蒸博水中.B.1.2.3取A液720mL,B液28mL两者混合即为PH7.2的磷酸缓冲液.B.1.3GiemSa工作液取100mL的磷酸缓冲液，加入3mLGiemSa染色母液.8.2 染色体的制备8.2.1 中国对肝胚胎或幼体或雄性成体性腺组织用0.02%秋水仙素溶液浸泡60min.8.2.2 将样品移入0.7%的氧化钾溶液中低渗30min.8.2.3 去低渗液,缓慢加入新配制的卡诺氏（CarnOy，S）固定液（3份甲静加1份冰乙酸）固定15min-20Inin,反复2次。8.2.4 将样品滴到冰冻的栽玻片上，室温下干燥.8.2.5 Giemsa工作液染色15min.8.3 染色体的计数按GB/T18654.12的规定执行.附录C(短范性)线粒体16SRNA序列分析C.1息DNA提取取肌肉组织研磨，用10%量白酶K消化后，按照标准的船-三氯甲烷抽提法或者使用试剂盒进行DNA的提取.C.2PCR扩增扩增引物序列为，1.2510j5,-CGCCTGTTTAACAAAAACAT-3i»H3059,5,-CCGGTCTGAACTCAGATCTGT-3反应体系为25fxL,其中包括：】OXPCRBuffer2.5>L,dNTP(2.5mmolL)2LtTaqDNA聚合酶(5UL)0.4L,上下游引物(10mmolL)各1人，模板DNA1以-补足灭菌双蒸水至终体积25U每组PCR均设阴性对照用来检测是否存在污染PCR扩增反应程序如下：94匕预变性2min,94C变性30s,50t退火30s,724C延伸30s,循环35次,72C后延伸5min所有PCR均在热循环仪上完成.C.3目标区域浏序PCR扩增产物使用1.5%琼脂精凝胶电泳于紫外灯下检测后，进行测序，用于测序的引物序列与PCR扩增使用的引物序列相同.C4遗传距离分析利用Kimura两参数模型(KimUra2paramet,K2P)计算检浏样品的序列与参考序列的遗传距离.
