霍乱的实验室检查.docx

霍乱的实验室检查(一)血液检查红细胞和血红蛋白增高，白细胞计数(1020)X1()9L或更高，中性粒细胞及单核细胞增多。血清钾、钠、氯化物和碳酸盐降低，血PH下降，尿素氮增加。治疗前由于细胞内钾离子外移，血清钾可在正常范围内，当酸中毒纠正后，钾离子移入细胞内而出现低钾血症。(二)尿检查少数病人尿中可有蛋白质、红白细胞及管型。(三)病原菌检查1.常规检查(1)粪便镜检可见黏液和少许红、白细胞。取粪便或早期培养物涂片作革兰染色镜检，可见革兰阴性稍弯曲的弧菌,无芽抱，无荚膜。0139群弧菌除了可产生荚膜外，其余与01群弧菌同。(2)悬滴检查将新鲜粪便作悬滴或暗视野显微镜检，可见运动活泼呈穿梭状的弧菌。2.培养(1)增菌培养所有疑为霍乱病人的粪便，除作显微镜检外，均应作增菌培养。粪便留取应在使用抗菌药物之前，且应尽快送到实验室作培养。增菌培养基一般用pH84的碱性蛋白陈水，3637t培养68小时后表面能形成菌膜。应进一步作分离培养、动力观察和制动试验。(2)分离培养常用庆大霉素琼脂平皿或碱性琼脂平板。前者为强选择性培养基，3637。C培养810小时霍乱弧菌即可长成小菌落。采用后者则需培养1020小时。选择可疑或典型菌落，用霍乱弧菌“0”抗血清作玻片凝集试验，若阳性即可出报告。近年来国外亦有应用霍乱毒素基因的DNA探针作菌落杂交，可迅速鉴定出产毒素01群霍乱弧菌。3 .免疫学试验制动试验取急性期病人的水样粪便或碱性腺水增菌培养6小时左右的表层生长物，先作暗视野显微镜检，观察动力。如有穿梭样运动物时，则加入01群多价血清一滴，若是01群霍乱弧菌，由于抗原抗体作用，则凝集成块，弧菌运动停止。如加01群血清后，不能制止运动，应再用0139血清重复试验。4 .分子生物学检查PCR方法:近年来应用PCR技术来快速诊断霍乱。检测基因亚单位CtXA、Zot和毒素协同菌毛基因(TCPA)。根据TCPA基因的不同DNA序列又可区别古典生物型和埃尔托生物型霍乱弧菌。近来还有采用荧光PCR法作快速诊断。