基因工程考试完整版试题.docx

填空4 .基因工程的两个基本特点是：（1）,O4.（1）分子水平上的操作：（2）细胞水平上的表达5 .基因克隆中三个基本要点是：和5.克隆基因的类型：受体的选择；载体的选择2,由于不同构型的DNA插入EB的量不同，它们在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率也不同，SCDNA的泳动速度,OCDNA泳动速度,LDNA居中，通过凝胶电泳和EB染色的方法可将不同构型的DNA分别开来。2.最快；最慢4.就克隆一个基因（DNA片段）来说，最简单的质粒载体也必需包括三个部分：、o另外，一个理想的质粒载体必须具有低分子量。4.复制区：含有复制起点；选择标记：主要是抗性基因；克隆位点：便于外源DNA的插入6.质粒拷贝数是指细胞中同粒的份数同染色体的比值，即质粒/柒色体13.YAC的最大容载能力是100Okt,BAC载体的最大容载能力是300kb3 .人噬菌体的基因组DNA为kb,有多个基因。在体内，它有两种复制方式，扩增时（早期复制）按复制，成熟包装（晚期复制）则是按复制。它有一个复制起点，进行向复制。'噬菌体的DNA既可以以线性存在又可以环状形式存在，并且能够自然成环。其原因主要是在'噬菌体线性DNA分子的两端各有一个个碱基组成的天然黏性末端。这种黏性末端可以自然成环。成环后的黏性末端部位就叫做位点。48.5;60;凯恩斯模型：滚环；双：12;COS4 .根据噬菌体的包装能力，将野生型人噬菌体的基因组DNA改造成插入型载体，该载体的最小分子大小约为kb,插入的外源片段最大不超过kb.36;145 .野生型的M13不适合用作基因工程载体，主要原因是和.o没有合适的限制性内切核酸酶识别位点：选择标记6 .黏粒（CoSmid）是质粒一噬菌体杂合载体，它的复制子来自、COS位点序列来自,最大的克隆片段达到kb.质粒：丸噬菌体；457 .有两类改造型的、噬菌体载体，即插入型和取代型。从酶切点看，插入型为个，取代型为个。1;28野次型的丸噬菌体DNA不宜作为基因工程载体，原因是：（3）。分子量大，（2）酶的多切点，（3）无选择标记11 .M13单链噬菌体基因2和基因4之间的IG区有三个最重要的功能，即（12（2）（3）.»（D正链更制起点；（2）负链曳制起点：（3）包装信号12 .野生型的M13有10个基因，分为三个功能集团，其中与复制有关的两个基因是：和。基因II;基因V13 .以入噬菌体载体和黏粒载体构建文库时，起始DNA的长度是不同的，前者为kb,后者为kb100kb;200kb14 .人噬菌体载体由于受到包装的限制，插入外源DNA片段后，总的长度应在噬菌体基因组的的范围内。75舟一105%5. II类限制性内切核酸的分子量较小.一般在2040kDa,通常由亚基所组成。它们的作用底物为双链DNA,极少数【I类酶也可作用于单链DNA,或DNA/RNA杂合双链。这类酶的专一性强，它不仅对酶切点邻近的两个碱基有严格要求，而且对更远的碱基也有要求，因此，II类酶既具有专一性，也具有.专一性，一般在识别序列内切割。切割的方式有,产生末端的DNA片段或的DNA片段。作用时需要作辅助因子，但不需要和024个相同的；切割位点；识别位点的：平切和交错切；平：具有突出黏睦末端：Mg2+;ATP;SAM6. 完全的回文序列具有两个基本的特点，就是：（1）.（2）。（1）能够在中间划一个对称轴，两侧的序列两两对称互补配对：（2）两条互补链的5'3'的序列组成相同，即将一条链旋转180°,则两条链重叠7. Il类限制性内切核酸酶一般识别个碱基，也有识别多序列的限制性内切核酸前。根据对限制性内切核酸酶识别序列的分析，限制性内切核酸酶识别序列具有倾向，即它们在识别序列中含量较高。46;GC10.限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的，第一个大写字母取自,第二、第三黑字母取自，第四个字母则用表示。属名的第一个字母；种名的前两个字母；20.限制性内切核酸醉通常保存在50%浓度的甘油溶液中。1 .连接酶（HgaSe）是一类用于核酸分子连接形成键的核酸合成篝，有DNA连接酶和RNA连接曲之分。璘酸二酯2 .原核生物主要有两种类型的DNA连接的：ExoIiDNA连接酶和T4DNA连接酶。基因工程中使用的主要是T4DNA连接酶，它是从T4噬菌体感染的Ecoli中分离的一种单链多肽前，分子量为kDa,由T4噬菌体基因一一编码。E.coliDNA连接酶是由大肠杆菌基因一编码，也是一条多肽链的单体，分子量为kDa.这两种DNA连接酎有两个重要的差异：第是它们在催化反应中所用的能量来源不同，T4DNA连接酶用,而ExoliDNA连接酶则用作为能源。第二是它们催化平末端连接的能力不同，在正常情况下只有T4DNA连接酶能够连接平末端，ExoliDNA连接酶则不能。即使是调整反应条件，EcoliDNA连接酶催化平末端的连接效率也只有T4DNA连接酶的。68;30;51;74;ATP;NAD;1/1OO选择3 .第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是A(a)EcoRI(b)EcoB(c)EcoC(d)EcoR114 .下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大？CA质粒；B黏粒；C酵母人工染色体(YAC);D噬菌体：ECDNA表达载体7 .ColEl是惟一用作基因工程载体的自然质粒，这种质粒：ACDA是松弛复制型：B具有四环素抗性C能被氯霉素扩增：D能产生肠杆菌素8 .同一种质粒DNA,以三种不同的形式存在，电泳时，它们的迁移速率是：BAOCDNA>SCDNA>LDNA;BSCDNA>LDNA>OCDNACLDNA>OCDNA>SCDNA;DSCDNA>OCDNA>LDNA9pBR322是一种改造型的质粒，含有两个抗性基因，其中四环素抗性基因来自：CAColEI;B;Ri质粒；CpSC101;DpUCI810 .关于质粒的相容性，下面哪种说法不正确？【DJA不同相容群的质粒能够共存于同一个细胞B质粒可以分成若干个不相容群，但不能分成若干个相容群C如果a、b两种质粒不相容，说明它们的复制机制相同D属于同一个不相容群中的质粒，不仅复制机制相同，而且拷贝数和分子量也相同11 .关于穿梭质粒载体，下面哪种说法最正确？BA在不同的宿主中具有不同的复制机制B在不同的宿主细胞中使用不同的复制起点C在不同的宿主细胞中使用不同的复制酶D在不同的宿主细胞中具有不同的复制速率13.第一个作为重组DNA载体的质粒是(C)ApBR322;BCoIEl;CpSCI01;DpUCI81 .关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有R不太恰当。A.由作用于同一DNA序列的两种酶构成B.这一系统中的核酸酶都是II类限制性内切核酸酶C.这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰D.不同的宿主系统具有不同的限制一修饰系统3. 11型限制性内切核酸酶：【B】A.有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列B.仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供C.限制性识别非甲基化的核甘酸序列D.有外切核酸酶和甲基化防活性E.仅有外切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供4. IH型限制性内切核酸的：CA.由两个亚基组成，仅识别半甲基化位点。甲基化位点相对于限制位点的位置(上游或下游)决定了DNA是被甲基化还是被限制R不同亚基的识别位点甲基化和限制活性相互排斥：MS亚基促使甲基化，R亚基促使限制C.由两个亚基组成，在识别位点附近识别并进行甲基化或限制D.在错配修复中起关键作用，因为酶结合到DNA上是以结构扭曲为基础而不是序列错误识别E.是光依赖型酶，是嗜嚏二聚体进行“光反应”的关键酶，它们能使胸腺喀咤二聚体间的共价键断裂9. 下面有关限制前的叙述哪些是正确的？BCDEA.限制醐是外切醐而不是内切醐B.限制酶在特异序列(识别位点)对DNA进行切割C.同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的D.一些限制酶在识别位点内稍有不同的点切割双倍DNA,产生黏末端E.一些限制酶在识别位点内相同的位置切割双链DNA,产生平末端14 .在下列试剂中，那一种可以螯合Ca2+离子？DA.EDTAB.柠檬酸钠C.SDSD.EGTA15 .在下列工具酶中，那一种可以被EGTA抑制活性？【D】ASl单链核酸酶B.末端转移酶C.碱性磷酸酶D.BH31核酸酶16 .限制性内切核酸酶可以特异性地识别：BA.双链DNA的特定碱基对B.双链DNA的特定碱基序列C.特定的三联密码D.以上都正确19 .限制性内切核酸酶的星号活性是指：【A】A在非常规条件下，识别和切割序列发生变化的活性。B.活性大大提高；C切割速度大大加快；D.识别序列与原来的完全不同20 .下面哪种不是产生星号活性的主要原因？DA.甘油含量过高B.反应体系中含有有机溶剂C含有巾独2+的二价阳离子D.酶切反应时酶浓度过低22 .关于回文序列，下列各项中，D是不正确的A.是限制性内切核酸酶的识别序列B.是某些蛋白的识别序列C.是基因的旁侧序列D.是高度重复序列1 .T4DNA连接醐是从T4噬菌体感染的Ecoli中分离的，这种连接醐(B)儿催化连接反应时既能以ATP又能以NAD作为能量来源B.既能催化平末端连接又能催化黏性末端连接C.是一种单肽酶，分子量为74kDaD.既能催化单链DNA连接乂能催化双链DNA连接2 .DNA连接酶在体内的主要作用是在DNA复制、修复中封闭缺口，（八）A.将双链DNA分子中的5,磷酸基团同3,-OH末端重新形成磷酸二酯键B.作用时不消耗能量C.需要Mn2+等二价辅助离子D.也可以连接RNA分子6 .在基因工程中，可用碱性磷酸酶(AB)A.防止DNA的自身环化8 .同多核甘酸激酶一起进行DNA的5,末端标记C.制备突出的3,末端D.上述说法都正确9 .从E.c(>li中分离的连接酶：A.需要ATP作辅助因子10 需要NAD作辅助因子C.可以进行平末端和黏性末端连接D.作用时不需要模板11 下列哪一种酶作用时需要引物？(C)A.限制酶B.末端转移前C.反转录的D.DNAOW判断；1 .迄今发现的质粒DNA都是环状的。F2 .线性质粒同环状质粒一样都不带有宿主必需的基因。F3 .有a、b、C三个质粒，因为a和b能够共存于一个细胞，a和C也可共存于同一个细胞，所以b和C一定能够共存于同一个细胞。F5 .如果两个不同的质粒可以稳定地共存于同一个细胞中，这两种质粒则属于同一个不亲和群。F6 .个带有反向重复序列的双链DNA经变性后，复性时其单链可形成发夹环。T7 .能够在不同的宿主细胞中复制的质粒叫穿梭质粒。T13 .所谓穿梭质粒载体是能够在两种以上的不同宿主细胞中复制的质粒，所用的复制起点不同。T14 .一般情况下，质粒既可以整合到染色体上，也可以独立存在。F15 .ColEl是唯一用作基因工程的自然质粒载体，它具有四环素抗性标记，因而很容易选择。F16 .某一染色体DNA经内切酶Sall切割后，产生了若干个具有黏性末端的DNA片段，将这些片段分别在T4DNA连接酎的作用下自身连接成环，然后导入受体细胞，都可以进行独立地复制。F18.基因克隆中，低拷贝数的质粒载体是没有用的。F1.限制与修饰现象是宿主的种保护体系，它是通过对外源DNA的修饰和